主权项 |
一种激素诱导快速繁殖蓖齿眼子菜工程苗的方法,其特征是,包括如下步骤:(1)植物体的消毒采集生长良好、健壮的蓖齿眼子菜植株,用清水清洗3~4遍,清除表面附着物,将叶子去除;然后对植物茎段消毒,先用75%的酒精浸泡5分钟,然后用5%的次氯酸钠溶液浸泡10分钟,最后用无菌水冲洗4~5次,每次2~3分钟,最后截取0.5~0.8cm带节间的茎段;(2)诱导培养将消毒后的植物茎段移入添加了0.5~2mg/L的6‑BA和0.1mg/L的IBA的MS培养基,设置20~25℃,光照强度2000~3000Lux,光照12h/d,培养10~15天,诱导生芽;每升MS培养基含:硝酸铵1650mg,硝酸钾1900mg,氯化钙440mg,硫酸镁370mg,磷酸二氢钾170mg,碘化钾0.83mg,硼酸6.2mg,硫酸镁22.3mg,硫酸锌8.6mg,钼酸钠0.25mg,硫酸铜0.025mg,氯化钴0.025mg,硫酸亚铁27.8mg,乙二胺四乙酸二钠37.3mg,肌醇100mg,烟酸0.5mg,盐酸吡哆醇(维生素B6)0.5mg,盐酸硫胺素(维生素B1)0.1mg,甘氨酸2.0mg。(3)增殖培养将经步骤(2)得到的培养物接入分化与增殖培养基中培养20~25天,以获得更多的蓖齿眼子菜的芽。分化与增殖培养基为每升MS培养基中加入1.0mg的6‑BA和0.1mg/L的IBA。(4)生根培养将步骤(3)获得的蓖齿眼子菜芽转接于生根培养液中诱导生根,培养10~15天即可得到蓖齿眼子菜苗,生根培养液为添加了0.5~2mg/L的NAA和0.02mg/L的6‑BA的霍格兰营养液;霍格兰营养液的配方:每升营养液中含:四水硝酸钙945mg、硝酸铵80mg、磷酸二氢钾136mg、硫酸镁493mg,七水硫酸亚铁2.78g,乙二胺四乙酸二钠3.73g;微量元素:碘化钾0.00415mg,硼酸0.031mg,硫酸锰0.1115mg,硫酸锌0.043mg,钼酸钠0.00125mg,硫酸铜0.000125mg,氯化钴0.000125mg。(5)炼苗将步骤(4)获得的蓖齿眼子菜苗,转接到育苗箱中自然条件下培养,待植株长至20~30cm即可移栽到自然水体。 |