基于双重扩增策略构建的免标记荧光适体传感器检测腺苷

摘要

本发明公开了一种基于双重扩增策略构建的免标记荧光适体传感器检测腺苷，包括以下步骤：（1）链霉亲和素化磁球-探针的制备；（2）Exo III辅助的DNA循环和HCR反应；（3）荧光测量：HCR反应完成后，向反应产物中加入NMM和KCl，孵育后进行荧光测量，得荧光值；(4)计算：根据上述所测得的荧光值利用下述线性方程计算含有腺苷的待检测物中腺苷的浓度。本发明中的两种信号扩增策略的结合为体液中低腺苷水平的检测提供了较高的灵敏度；该方法还能显著的区分癌症病人和正常人尿液中腺苷的含量，表明该方法能够为医学研究和早期临床诊断提供一种新的可靠的用于腺苷定量的策略。

主权项

一种基于双重扩增策略构建的免标记荧光适体传感器，其特征是：包含催化链、适体链和链霉亲和素化磁球三功能探针；其中，所述催化链为：5’‑ACT GCA TCG CAA TAC TCG ATT TTT T‑3’，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；所述适体链为：5’‑biotin‑TTT TTT TTT ACC TGG GGG AGT ATT GCG GAG GAA GTT‑3’，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。