一种蓝雪花组织培养技术

摘要

本发明公开了一种蓝雪花组织培养技术，蓝雪花（Plumbago auriculata）结实率低,种子价格较为昂贵,扩繁系数低、造成目前传统繁殖方式己无法满足蓝雪花的应用需求,而本发明可以克服传统繁殖方法的不足之处,在相对短的时间内可大量生产蓝雪花优良品种。本发明以蓝雪花细嫩枝条为外植体，经过外植体处理、单芽诱导、丛生芽增殖、生根、炼苗及移栽等过程建立了蓝雪花离体再生体系，大大提高蓝雪花增殖率,对实现蓝雪花组织培养工厂化生产提供技术支持。

主权项

一种蓝雪花组织培养技术，其特征在于包括以下步骤：    （1）外植体消毒：剪取长势良好无病虫害的幼嫩枝条,用洗衣粉溶液浸泡处理40～90min后流水冲洗1～3h，于超净工作台中用75%乙醇消毒30～60s后用无菌水洗3～5次，再用0.1%升汞溶液消毒10～25min，用无菌水冲洗4～6次后用无菌滤纸吸去水分备用；    （2）单芽诱导：将步骤（1）处理后的外植体切成1.0cm长左右的茎段,其中以茎节为界,上半部分保留0.3cm，下半部分保留0.7cm，每个茎段保留一个茎节，将茎段接种到诱导培养基中进行单芽诱导，接种后先在25～28℃条件下全暗培养5～10天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为1500～3000lx条件下培养直至形成单芽；（3）丛生芽培养及增殖：将步骤（2）培养得到的单芽长至2～3cm高时，切下单芽并转入丛生芽培养基上进行丛生芽培养及增殖，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照12～16小时，光照强度为2000～3000lx，置于培养温度为25～28℃的条件下培养直至形成丛生芽；（4）生根培养：将步骤（3）的丛生芽长至3～4cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在25～28℃条件下全暗培养1～3天，然后置于每天光照14～16小时，光照强度为3000～5000lx，培养温度为25～28℃的条件下培养至生根；（5）炼苗移栽：将高约6～7cm的生根试管苗的培养瓶盖半开炼苗3～5天，再全开瓶盖加入适量的自来水并置于自然光照下炼苗5～7天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土和黄沙泥混合成的基质中并定植于大田中。