基于特异性SS-COI引物的棉长管蚜PCR快速检测方法

摘要

基于特异性SS-COI引物的棉长管蚜PCR快速检测方法，所述引物为正向引物Ag22F和反向引物Ag22R，该引物只对棉长管蚜具有特异性扩增效果，扩增产物大小为260bp，DNA最低检出浓度为0.170ng/μL。用于植保领域棉长管蚜优势天敌确定及食物链分析，特异性强，准确率高，方便快捷易操作。

主权项

一种基于特异性SS‑COI引物的棉长管蚜PCR快速检测方法，其特征在于所述的特异性引物为正向引物Ag22F：5’‑TCTTAATTAATAATGGTACG‑3’反向引物Ag22R：5’‑ACCAGCTAAAACTGGTAGAG‑3’该检测方法包括以下步骤：a.提取样品DNA；b.以提取样品的DNA为模板，进行PCR扩增反应；反应体系为反应条件为：94℃3分钟，94℃30秒，51℃30秒，72℃1分钟，共45个循环；之后72℃10分钟。c.对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，如出现大小为260bp的DNA扩增条带，则表明样品为棉长管蚜。