模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽

摘要

本发明的模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，涉及生物技术领域，其生产步骤包括预处理、酶解、分离和纯化四个步骤，并在纯化步骤中利用模拟移动色谱分离法，对分离后的粗乳清蛋白肽进行工业化生产，得到乳清蛋白抗氧化肽。此生产方法自动化程度高、减少吸附剂及水的浪费与污染、提取效率高，既提高了乳清蛋白的利用率，又获得了高活性抗氧化肽；通过本发明制得的乳清蛋白抗氧化肽、其DPPH自由基清除活性IC₅₀值为1.8mg/mL，羟自由基清除活性IC₅₀为110μg/mL；且该方法生产成本低，便于工业化生产；所获得抗氧化肽产品安全、无毒副作用、抗氧化活性高、质量稳定，可广泛应用于食品、化妆品和医药等领域。

主权项

模拟移动色谱分离法制乳清蛋白抗氧化肽，其操作步骤如下：a、预处理：将1份乳清蛋白粉与10～35份水混合，在95℃下恒温5min后，降温至45℃～60℃，用NaOH溶液调节溶液pH至7.0～8.5，制成乳清蛋白溶液；b、酶解：在a步骤制得的乳清蛋白溶液中加入碱性蛋白酶0.005～0.02份，同时用NaOH溶液维持系统的pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌2.0～6.0h后，再加入胰蛋白酶0.005～0.02份，仍维持反应液pH为7.0～8.5，在45℃～60℃的条件下搅拌1.0h～3.0h，然后升温至85℃～100℃，保持10min～15min，制得乳清蛋白酶解液；c、分离：去除b步骤制得的乳清蛋白酶解液中的固体物质，收集酶解液中分子量小于1000Da的滤液，制得粗乳清蛋白肽；d、纯化：将粗乳清蛋白肽用水调制成混合液、其质量百分比浓度为5%～25%，用模拟移动床连续吸附进行分离纯化，然后将吸附液进行喷雾干燥，即制得乳清蛋白抗氧化肽；以上均为质量份数。