针对柑橘全爪螨进行基因功能验证的方法

摘要

本发明涉及一种针对柑橘全爪螨进行基因功能验证的方法，包括如下步骤：1)准备目的基因dsRNA溶液：根据要抑制的目的基因合成相应的dsRNA溶液；2)用柑橘叶片制作叶碟，清洗干净；3)将叶碟干燥处理至叶碟明显皱缩，用离心管盖盛装步骤1中制备好的dsRNA溶液，将叶碟漂浮于dsRNA溶液上至恢复原状不再皱缩；4)将柑橘全爪螨置于漂浮的叶碟上，将叶碟放入培养箱，在22-28℃、湿度55-65％和光照:黑暗为14h:10h的条件下培养60-80小时；5)培养结束后，收集柑橘全爪螨虫体提取RNA，检测步骤1中的目的基因的表达情况。本发明解决了柑橘全爪螨目前没有有效的dsRNA导入方法的问题。

主权项

一种针对柑橘全爪螨进行基因功能验证的方法，其特征在于：包括如下步骤：1)准备目的基因dsRNA溶液：根据要抑制的目的基因制备相应的dsRNA溶液；2)用柑橘叶片制作叶碟，用无核酸酶水清洗干净；3)将清洗后的叶碟干燥处理至叶碟明显皱缩，用离心管盖盛装步骤1中制备好的dsRNA溶液，将叶碟漂浮于dsRNA溶液上，让叶碟吸收dsRNA溶液至恢复原状不再皱缩；4)将柑橘全爪螨置于步骤3中漂浮的叶碟上，将叶碟连同离心管盖放入培养箱，用带透气孔的盖子盖住离心管盖，在22‑28℃、湿度55‑65％和光照:黑暗为14h:10h的条件下培养60‑80小时；5)培养结束后，收集柑橘全爪螨虫体提取RNA，检测步骤1中的目的基因的表达情况。