获得高产稳定表达细胞克隆的方法及由此获得的抗体分子

摘要

本发明涉及在无蛋白培养基中获得重组骨髓瘤细胞克隆的方法。这个过程包含重组骨髓瘤细胞系，在这个过程中，从无血清培养基到无蛋白培养基几乎是不可能的或者需要很长的时间，并且由于非生长细胞群的存在而伴随着抗体产量的降低。这个过程包含在无蛋白培养基中由低浓度到高浓度逐渐适应的过程。在无蛋白培养基中以高细胞密度培养的表型适应伴随着重组抗体分子分泌率和高产稳定表达细胞克隆百分比的提高。在本发明中公开的细胞克隆能够生产人源化的抗NeuGcGM3 14F7h重组抗体。更进一步的，这个人源化的抗-NeuGcGM3重组抗体14F7hare的属性特征也在本发明中被公开。

主权项

一种在无蛋白培养基中从骨髓瘤细胞系获得高产稳定表达细胞克隆的方法，所述方法用于工业上生产重组抗体，其特征在于，所述的方法包含三个阶段：I．适应无蛋白培养基，低密度静止细胞培养，逐步减少富含脂质的补充物到化学培养基中；II．适应无蛋白培养基：以高密度细胞培养，在实验室规模采用灌流发酵系统；III．发酵结束时从细胞中筛选高产稳定表达的细胞克隆。