发明名称 |
单分子生物反应器制备单微纳米珠携带单根多聚物的方法 |
摘要 |
一种单分子生物反应器制备单微纳米珠携带单根多聚物的方法,上游为单分子生物反应器、下游为目的产物分离与富集器;将多聚物一端用活性基团标记,另一端或侧链用荧光物种标记,微纳米珠包被可与多聚物活性基团连接的活性基团,多聚物与微纳米珠按摩尔比1:≥10的比例注入单分子反应器,经完全连接后,经目的产物分离与富集器获得高纯度目的产物即单个微纳米珠只携带一根多聚物的复合物;本发明方法获得的目的产物,可用于单分子水平的核酸-蛋白质互作动力学、抗体筛选、单分子测序以及第二代测序仪的样品制备等。 |
申请公布号 |
CN103305603B |
申请公布日期 |
2015.05.20 |
申请号 |
CN201310100338.X |
申请日期 |
2013.03.26 |
申请人 |
上海交通大学 |
发明人 |
王志民;程秀兰;侯彩玲;黄伟东;王跃;张林霞 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;G01N1/28(2006.01)I;G01N33/531(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海汉声知识产权代理有限公司 31236 |
代理人 |
郭国中 |
主权项 |
一种单分子生物反应器制备单微纳米珠携带单根多聚物的方法,其特征在于,该方法中获得一端标记有活性基团、另一端或侧链标记有荧光分子的多聚物以及用与标记多聚物活性基团发生连接反应的活性基团包被的微纳米珠后,采用一内部有溶液通道的流室,流室分为上游的单分子生物反应器、下游为目的产物分离与富集器;上游的单分子生物反应器,设有多聚物进样口和微纳米珠进样口;将多聚物溶液和微纳米珠悬浮液注入流室,使反应成份在反应器充分反应后彻底完成连接;连接反应后的混合物经溶液通道进入流室下游的目的产物富集器,目的产物富集器设有填充电泳缓冲液进样口连接流室溶液通道,流室溶液通道末端设有目的产物收集口和空微纳米珠出口,分别连接目的产物收集容器和空微纳米珠收集容器;目的产物收集容器连接电源正极,与目的产物收集容器对应的流室溶液通道另一处连接电源负极,利用外加电场,使携带负电荷的目的产物进入目的产物收集容器,空微纳米珠通过空微纳米珠出口进入空微纳米珠收集容器,完成目的产物分离与富集器功能;所述的多聚物和微纳米珠,按照以下方法制备:步骤一,在多聚物一端标记活性基团,另一端或侧链标记有荧光分子;所述的多聚物,是核酸、核酸与蛋白质、核酸与人工合成的肽核酸多聚物连接后的嵌合体中的一种;步骤二,微纳米珠包被能够与步骤一多聚物活性基团发生连接反应的活性基团;所述的多聚物与微纳米珠,按摩尔比1:≥10的比例进样,进样速度由进样控制器控制。 |
地址 |
200240 上海市闵行区东川路800号 |