利那洛肽的制备方法

摘要

本发明提供利那洛肽的制备方法，利用标准的Fmoc技术，将侧链保护的氨基酸与WANG树脂相连，加入缩合剂HBTU和碱DIPEA，在DMF溶剂中发生缩合反应，采用含20%六氢哌啶的DMF溶液进行脱Fmoc保护,然后从固相树脂上切下来。在磷酸钠缓冲溶液中加入碘单质进行氧化Cysteine，获得利那洛肽。本发明提供的利那洛肽的制备方法是高产率的合成利那洛肽的工艺，简化了环化过程，提升了环化产率，最终产品收率达到30%-60%；该制备方法简便、反应条件温和、收率较高、得到产品纯度高，是利那洛肽产业化可行的制备方法，为工业生产提供了良好的前景。

主权项

具有如下结构的利那洛肽的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：（1）采用固相Fmoc技术，将羧基树脂和侧连带有保护基的Fmoc酪氨酸置于反应瓶中，加入有机碱和偶合剂，在DMF溶液中反应后，脱除Fmoc保护基团，得到与侧连带有保护基的酪氨酸偶联的树脂；（2）将步骤（1）得到的与侧连带有保护基的酪氨酸偶联的树脂直接和侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸置于反应瓶中，加入有机碱及偶合剂，在DMF溶液中反应后,脱除Fmoc保护基团，得到进一步与侧连带有保护基的半胱氨酸偶联的树脂；（3）依次重复步骤（2），其中原料氨基酸依次替换为Fmoc甘氨酸、侧连带有保护基的Fmoc苏氨酸、侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸、Fmoc丙氨酸、Fmoc脯氨酸、侧连带有保护基的Fmoc天冬酰胺、侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸、侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸、侧连带有保护基的Fmoc苏氨酸、侧连带有保护基的Fmoc谷氨酸、侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸、侧连带有保护基的Fmoc半胱氨酸，最终得到脱除Fmoc保护基团、且与上述氨基酸依次偶联的树脂；（4）切割步骤（3）所得与上述氨基酸依次偶联的树脂，得到化合物：HO‑Tyr‑Cys‑Gly‑Thr‑Cys‑Ala‑Pro‑Asn‑Cys‑Cys–Tyr‑Glu‑Cys‑Cys‑H；（5）将步骤（4）所得化合物用单质碘在pH=6‑13的磷酸钠缓冲溶液中氧化,形成三个二硫键得到利那洛肽产品：