| 主权项 |
心球衍生细胞(CDC)群在制备增强哺乳动物的受损或患病心脏的功能的药物中的应用：其中所述受损或患病心脏在左心室射血分数(LVEF)和左心室面积分数(LVFA)方面具有缺陷；其中所述CDC群表达c‑Kit、CD105、心脏肌球蛋白重链(cMHC)和心脏肌钙蛋白I(cTnI)；其中所述CDC群通过下述步骤获得：酶法消化从哺乳动物获得的心脏组织以产生外植体，其中所述酶法消化使用选自胶原酶、基质金属蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的蛋白酶进行，在包被纤连蛋白的培养物表面上培养所述外植体，所述外植体在完全外植体培养基中温育30分钟以产生粘附的外植体，使用完全外植体培养基，在完全外植体培养基中培养所述粘附的外植体8天以上，直到基质样细胞层从所述粘附的外植体产生，并且小的圆的亮相细胞迁移到所述基质样细胞层上的时刻，其中完全外植体培养基包括20％热灭活胎牛血清、100单位/mL的青霉素G、100μg/mL链霉素、2mmol/L L‑谷氨酰胺和0.1mmol/L 2‑巯基乙醇的IMDM培养基；酶法收获所述小的圆的亮相细胞，其中所述酶法收获包括通过用蛋白酶消化分离所述松散粘附的圆的亮相细胞，在包被聚‑D‑赖氨酸的第一表面上以2‑5×10<sup>4</sup>个细胞/ml培养所述收获的小的圆的亮相细胞4‑28天的时期以产生心球，其中心球生长培养基包括65％1∶1的Dulbeco′s Modified Eagle Media和Ham′s F‑12补充物和35％所述完全外植体培养基以及2％B27、25ng/mL表皮生长因子、80ng/mL碱性成纤维细胞生长因子、4ng/mL心肌营养蛋白‑1和1单位/mL凝血酶，收获所述心球，在包被纤连蛋白的表面上用所述完全外植体培养基培养所述心球，在所述第二表面上，使所述培养的心球形成贴壁单层，从而形成CDC；和其中所述CDC适合于输送至所述哺乳动物的所述受损或患病心脏并移入所述患病心脏；和其中所述CDC的所述移入适合于增加LVEF和LVFA，从而增加心脏功能。 |
