检测大鼠毛发状梭菌的试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种检测大鼠毛发状梭菌的试剂盒，以及一种检测大鼠毛发状梭菌的荧光定量PCR方法。该方法通过分析比较大鼠毛发状梭菌(泰泽氏菌)的基因组数据，针对大鼠毛发状梭菌(泰泽氏菌)的特异性功能基因设计特异性引物，进行荧光定量PCR诊断，根据片段大小及退火温度等因素来判断试验结果。该试剂盒提供的快速检测技术无需要进行微生物培养、扩增与检测同步进行，具有操作简便、快速、特异性好、灵敏度高等特点，可以替代一直沿用的分离培养的传统诊断方法，并适用于在实验动物检质量控制中推广使用。

主权项

一种检测大鼠毛发状梭菌的试剂盒，其特征在于，包括10×Taqman PCR缓冲液、50μmol·L^‑1的上游引物CPF的水溶液、50umol·L^‑1的下游引物CPR的水溶液、dNTP、25mmol·L^‑1的MgCl₂水溶液、5U·L^‑1的Taq DNA聚合酶水溶液、标准阳性模板、20×SYRB Green荧光染料和无菌双蒸水；所述上游引物CPF的序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物CPR的序列如SEQ ID NO.2所示；所述标准阳性模板为大鼠毛发状梭菌DNA。