睡莲花的鉴别和含量测定方法

摘要

本发明公开了睡莲花的一种鉴别和含量测定方法，包括睡莲花中没食子酸和烟花苷的薄层鉴别方法和含量测定方法。步骤一、采用薄层色谱法对睡莲花中的没食子酸和烟花苷进行定性分析；步骤二、采用高效液相色谱法对睡莲花中没食子酸和烟花苷进行含量测定。本发明对睡莲花提出了质量控制，具有较强的专属性和良好的重现性，真正体现了药品的安全有效性和质量可控性。

主权项

一种睡莲花的鉴别和含量测定方法，睡莲花中没食子酸和烟花苷的薄层鉴别方法和含量测定方法，具体步骤如下：步骤一、采用薄层色谱法对睡莲花中的没食子酸和烟花苷进行定性分析在硅胶GF254薄层板上，分别点没食子酸‑甲醇溶液、睡莲花药材‑甲醇溶液，在聚酰胺薄膜上，点烟花苷‑甲醇溶液、睡莲花药材‑甲醇溶液，以乙酸乙酯‑甲酸‑水按体积比为8:1:1为展开剂展开，取出，晾干，置于荧光灯下检视；步骤二、采用高效液相色谱法对睡莲花中没食子酸和烟花苷进行含量测定   1）对照品的制备精密称取对照品没食子酸和烟花苷，加甲醇制成没食子酸和烟花苷的对照品储备液，浓度分别为0.650mg/ml、0.531mg/ml；分别吸取没食子酸和烟花苷对照品储备液各1ml、2.5ml，加甲醇稀释，得到含烟花苷和没食子酸的对照品混合溶液，所含烟花苷的浓度为0.1328mg/ml、所含没食子酸的浓度为0.0650mg/ml；2）供试品的制备    精密称取1g睡莲花药材粉末，置于50ml具塞锥形瓶中，加入50ml甲醇，称重，超声提取30min，放冷后，称量质量并用甲醇补足质量差，过滤，置于样品瓶中，作为供试品溶液；    3）含量测定   测定睡莲花中没食子酸和烟花苷的含量时，采用没食子酸及烟花苷标准品做对照品，绘制进样量—色谱峰面积的标准曲线，测定睡莲花的色谱峰面积，从标准曲线上读出睡莲花中没食子酸及烟花苷的含量，其中，液相色谱测定峰面积的色谱条件为：色谱柱的直径和长度为4.6mm×250mm，5µm的Wondasil^TM C18，检测波长为270nm，流动相为甲醇和0.1%冰乙酸混合水溶液，柱温为30℃，流速为1mL/min，进样量为5µl，采样时间为50min，采用梯度洗脱，所述梯度洗脱具体为：流动相中0.1%冰乙酸的体积百分数随时间变化为0.01～10min，从90%线性降至75%；10～25min，从75%线性降至55%；25～35min，从55%线性降至45%；35～50min，从45%线性降至0%。