用于在丝状真菌菌株沉默基因表达的方法及其应用

摘要

本发明涉及通过转移性RNA干扰在丝状真菌菌株沉默基因表达的方法。本发明还涉及用于鉴定编码感兴趣的生物物质的基因的方法。

主权项

一种用于在丝状真菌菌株中共沉默编码生物物质的基因的表达的方法，包括：(a)向该丝状真菌菌株的基因组中插入一个双链可转录核酸构建体，该构建体包括一个可操作地连接至一个第一多核苷酸的启动子，该第一多核苷酸包括一个与编码第一生物物质的第一靶基因具有同源性的第一可转录区，一个第二多核苷酸，该第二多核苷酸包括一个与编码第二生物物质的第二靶基因具有同源性的第二可转录区，以及一个第三多核苷酸，该第三多核苷酸包括一个与该第一和第二靶基因无有效同源性的第三可转录区；其中该第三可转录区包括两个在相反方向上彼此互补的区段；并且其中该第一、第二和第三可转录区被转录为一个单链RNA分子；并且(b)通过以下产生短干扰RNA(siRNA)：将该丝状真菌菌株在一定条件下培养，以产生该双链可转录核酸构建体的RNA转录本，这些RNA转录本然后被转化为siRNA，这些siRNA与这些靶基因的RNA转录本相互作用，以沉默编码该第一和第二生物物质的靶基因的表达。