一种高产洛伐他汀的生产方法

摘要

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种高产洛伐他汀的生产方法及该生产方法所用到的红曲菌，其包括菌种的诱变以及利用该诱变菌种进行发酵，本发明的有益效果是：本发明的诱变菌株及其生产洛伐他汀的方法，与常规红曲霉生产菌株及生产方法相比，其洛伐他汀产量可达到1650mg/L以上，洛伐他汀生产能力更高，提高了洛伐他汀的质量。

主权项

一种高产洛伐他汀的生产方法，包括下述步骤：菌种诱变：以生理盐水从初始菌株紫色红曲菌生长斜面上将孢子洗下，制得孢子悬液，接种种子培养基，培养36 h，取菌悬液以无菌纱布过滤，以玻璃珠震荡打散至单孢子悬液，收集单孢子悬液然备用；在无菌试管内加入等体积的单孢子悬液和1%的氯化锂溶液，充分混合，放置3个小时，最后用无菌磷酸缓冲液稀释100倍，终止反应；吸取1 mL经氯化锂处理过的孢子稀释液注入无菌小皿中，置于激光下照射；照射时间为8‑12min，激光波长：630‑640 nm　照射功率密度为15‑18 mw/cm²；将诱变处理后的菌液稀释后涂布PDA固体平板，26‑32℃培养3‑4 d；将长出的单菌落转接到固体PDA平板的一侧，26‑32℃培养4‑5 d后，在平板另一侧转接构巢曲霉，26‑32℃下进行对峙培养7‑8 d；选取构巢曲霉菌落直径为3.0‑5.0cm的红曲霉菌株，从平板上刮取红曲霉孢子转接到种子培养基上，26‑32℃培养2‑5 d，按照12‑16%的接种量，将长好的种子培养基转接到发酵培养基中，26‑32℃摇床120‑180 r/m培养2‑5 d后，20‑25℃摇床120‑180 r/m培养18‑25d。