发明名称 |
一种基于FISH技术的活细菌定量检测方法 |
摘要 |
本发明属于微生物检测领域,涉及一种基于FISH技术的活细菌定量检测方法。该方法在常规荧光原位杂交方法的实施过程前,增加PMA核酸染料的预处理步骤;在PMA处理过程中,死菌细胞内的核酸与PMA共价结合,在荧光显微镜的蓝光激发下发出橙色荧光,从而可知橙色荧光的细菌为原体系中的死菌,活菌细胞内的rRNA在杂交步骤与荧光探针结合,荧光探针在荧光显微镜的蓝光激发下发出绿色荧光,从而可知绿色荧光的细菌为原体系中的活菌。本发明通过对荧光原位杂交技术的改进,即增加PMA染料处理的步骤,实现了样品体系中死活菌的有效区分,构建出一套可快速定量样品中活性细菌的方法。本方法对细菌定量具有较强的普适性。 |
申请公布号 |
CN104561354A |
申请公布日期 |
2015.04.29 |
申请号 |
CN201510048532.7 |
申请日期 |
2015.01.30 |
申请人 |
福州大学 |
发明人 |
倪莉;陈智超;刘志彬;张雯 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/06(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
福州元创专利商标代理有限公司 35100 |
代理人 |
蔡学俊 |
主权项 |
一种基于FISH技术的活细菌定量检测方法,其特征在于:在常规荧光原位杂交方法的实施过程前,增加PMA核酸染料的预处理步骤;在PMA处理过程中,死菌细胞内的核酸与PMA共价结合,在荧光显微镜的蓝光激发下发出橙色荧光,从而可知橙色荧光的细菌为原体系中的死菌,活菌细胞内的rRNA在杂交步骤与荧光探针结合,荧光探针在荧光显微镜的蓝光激发下发出绿色荧光,从而可知绿色荧光的细菌为原体系中的活菌。 |
地址 |
350108 福建省福州市闽侯县上街镇大学城学园路2号福州大学新区 |