免疫杀手细胞及其制造方法，包含其的医药组成物及套组

摘要

本发明涉及一种免疫杀手细胞及其制造方法，包含其的医药组成物及套组，其特征为利用包含刀豆球蛋白的培养基中，进行该免疫杀手细胞的诱导、维持或扩大培养的步骤。由于其培养过程当中不使用抗体蛋白作为刺激物，可避免人畜共通疾病的感染风险，且可有效增加免疫杀手细胞的数量及活性。

主权项

一种免疫杀手细胞的制造方法，其进行该免疫杀手细胞的培养步骤中不使用抗体蛋白，步骤包含：(1)分离周边血液单核细胞并置于一第一培养基中，调整细胞浓度为0.5×10⁶～2×10⁶个/mL，于二氧化碳培养箱中培养；(2)于该第一培养基中培养2至6天后，再置放于一第二培养基中，调整将细胞浓度为0.3×10⁶～2×10⁶个/mL，于二氧化碳培养箱中培养；(3)视细胞生长密度，每隔2至3天加入不同浓度的该第二培养基，调整细胞的浓度为0.3×10⁶～2×10⁶个/mL，于二氧化碳培养箱中培养；(4)重复步骤(3)操作，直至总共培养天数至少14天为止；所述第一培养基在RPMI‑1640培养基、IMDM培养基、ALys培养基或AIM‑V培养基中的任一种的基础上，再加入如下成分：步骤(2)所述第二培养基在RPMI‑1640培养基、IMDM培养基、ALys培养基或AIM‑V培养基中的任一种的基础上，再加入如下成分：白介素‑2      200～600IU/mL；干扰素‑γ     100～300U/mL；白介素‑15     10～50ng/mL；步骤(3)所述第二培养基在RPMI‑1640培养基、IMDM培养基、ALys培养基或AIM‑V培养基中的任一种的基础上，再加入如下成分：白介素‑2       100～500IU/mL；干扰素‑γ      80～150U/mL；白介素‑15      10～30ng/mL；培养出的免疫杀手细胞包含：5～20％的具CD3阴性、CD56阳性表型的自然杀手细胞、15～50％的具CD3阳性及CD56阳性表型的自然杀手T细胞、10～30％的具有γδ型T细胞受器的T细胞及40～70％的具αβ型T细胞受器的典型杀伤性T细胞。