表达纤维素酶的重组酵母菌株及其应用

摘要

本发明属于基因工程技术领域，具体为一种表达纤维素酶的重组酵母菌株及其在生产纤维素酶方面的应用。多拷贝纤维素酶基因整合入分泌型表达载体，构建出酶蛋白分泌表达质粒，导入毕赤酵母受体菌，得到表达纤维素酶的重组毕赤酵母菌。本发明的表达纤维素酶的重组毕赤酵母菌酶产率高，活性高，可以胞外分泌酶蛋白。

主权项

一种表达纤维素酶的重组酵母菌株，其特征在于，纤维素酶基因多拷贝整合到毕赤酵母相容性质粒pPICZαABC中，构建出酶蛋白分泌表达质粒，导入毕赤酵母受体菌，得到表达纤维素酶的重组酵母菌株，所述毕赤酵母受体菌为巴斯德毕赤酵母GS115，具体为：（1）里氏木酶里氏木酶外切酶CBHII ，GeneBank编号 M16190.1，多拷贝整合到毕赤酵母相容性质粒pPICZαABC中，构建出里氏木酶外切酶CBHII  M16190.1酶蛋白分泌表达质粒，获得表达里氏木酶外切酶CBHII  M16190.1的重组毕赤酵母菌；（2）里氏木酶里氏木酶外切酶CBHII ，GeneBank编号M55080.1，多拷贝整合到毕赤酵母相容性质粒pPICZαABC中，构建出里氏木酶外切酶CBHII  M55080.1酶蛋白分泌表达质粒，获得表达里氏木酶外切酶CBHII M55080.1的重组毕赤酵母菌；（3）里氏木酶β葡糖苷酶BGLII，GeneBank编号AB003110.1，多拷贝整合到毕赤酵母相容性质粒pPICZαABC中，构建出里氏木酶β葡糖苷酶BGLII酶蛋白分泌表达质粒，获得表达里氏木酶β葡糖苷酶BGLII的重组毕赤酵母菌。