一种菘蓝的组培快繁方法

摘要

本发明公开了一种菘蓝的组培快繁方法，包括菘蓝无菌苗的获得、丛生芽的获得、生根培养、炼苗等步骤。本发明由于采用剥去外皮的菘蓝种子为实验材料，缩短了出苗时间，增加了出苗率。以MS+ 1.3-1.7 mg/L 6-BA + 0.5-1.0 mg/L NAA为丛生芽诱导培养基，缩短了丛生芽诱导时间，提高了丛生芽诱导率，为在短时间内获得大量丛生芽提供了保障。以1/2 MS + 0.3-0.7 mg/L IBA为生根培养基，获得了大量细长健壮的根系，为幼苗存活奠定了基础。由于炼苗时以蛭石、草炭、珍珠岩的混合物为培养介质，保证了幼苗成活率。

主权项

一种菘蓝的组培快繁方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）菘蓝无菌苗的获得：取菘蓝种子，剥去种皮，在超净工作台上放入灭菌的50mL三角瓶中，加入10mL75%的乙醇浸泡30S，倒出乙醇，加入2.5%的次氯酸钠溶液，消毒10‑15min，倒出次氯酸钠，无菌水冲洗5遍，取出种子放于100mL已灭菌的装有20mLMS培养基的三角瓶中，将三角瓶放于25℃光照培养箱中，光强1200lux，每天光照16小时，3‑4天后，种子发芽，约30天后，菘蓝苗长至10cm；（2）丛生芽的获得：在超净工作台上将菘蓝叶片剪成长1cm的小段放于灭菌的装有20mL丛生芽培养基MS+ 1.3‑1.7 mg/L 6‑BA + 0.5‑1.0 mg/L NAA的100mL三角瓶中，将三角瓶放置于22±1℃光照培养箱中，光强1200lux，每天光照16小时， 25天后，长出大量丛生芽，40天后，丛生芽高度达到1‑2cm；（3）生根培养：在超净工作台上用灭菌剪刀剪下丛生芽，放置于灭菌的装有20mL生根培养基1/2 MS + 0.3‑0.7 mg/L IBA的100mL三角瓶中，将三角瓶放置于23±1℃光照培养箱中，光强1200lux，每天光照16小时，20天后，长出大量根，40天后，株高达到10cm；（4）炼苗：将步骤（3）中生根并已长至10‑15cm的幼苗，打开封口膜置于温室中炼苗3‑5天，洗去根部培养基，移入灭菌处理过的体积份数比为蛭石：草炭：珍珠岩=15：5：2的混合介质中，放置于温室中，上面覆薄膜，每天敞开薄膜，通风2次，20天后，幼苗成活率达96%。