无标记电致化学发光瘦肉精免疫传感器的制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种无标记电致化学发光瘦肉精免疫传感器的制备方法，属于新型纳米功能材料和生物传感器领域。本发明首先在二氧化钛纳米颗粒基底上，利用光电化学合成方法，制备核壳结构的枝晶纳米棒状的贵金属合金纳米材料，进而制得了成本低、灵敏度高、特异性好、检测快速、制备简单的检测瘦肉精的无标记电致化学发光免疫传感器。

主权项

无标记电致化学发光瘦肉精免疫传感器的制备方法，其特征在于，制备步骤为：（1）以直径4 mm的玻碳电极为工作电极，在电极表面滴涂5~10 uL 二氧化钛纳米粒子溶胶TiO₂ NPs，室温下晾干后，滴涂5~10 µL的金银纳米棒‑壳聚糖复合材料Au@Ag NRs‑CHS溶液，并在室温下晾干；（2）将步骤（1）中得到的电极超纯水清洗，室温下晾干成膜，表面滴涂5~10uL 0.01 mol/L 的氯钯酸溶液H₂PdCl₄，立刻使用高压汞灯照射30~90秒，制得TiO₂ NPs负载的金银钯合金纳米棒‑壳聚糖复合材料TiO₂‑Au@Ag‑Pd NDRs‑CHS修饰的工作电极，室温下晾干；（3）将步骤（2）中得到的电极用超纯水清洗，室温下晾干后，将电极浸入到EDC/NHS溶液中，1小时后取出；（4）将步骤（3）中得到的电极用超纯水清洗，在电极表面滴涂5~10 µL 10 µg/mL的瘦肉精抗体溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干；（5）将步骤（4）中得到的电极用超纯水清洗，继续在电极表面滴涂5~10µL 100 µg/mL的牛血清白蛋白BSA溶液，4 ℃ 冰箱中保存晾干，超纯水清洗，4 ℃ 冰箱中晾干成膜，制得无标记电致化学发光瘦肉精免疫传感器；所述的TiO₂ NPs为1mg/mL 的二氧化钛纳米粒子水溶液；所述的Au@Ag NRs‑CHS为金@银核壳纳米棒与壳聚糖复合材料的水溶液，所述金@银核壳纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以银纳米粒子为壳层的核壳结构的棒状纳米粒子，所述棒状纳米粒子的长度为20~50nm，所述壳聚糖为将壳聚糖纯品加入到体积分数为1% 的醋酸中制备而成的壳聚糖水溶液；所述的H₂PdCl₄为pH值为1~2的氯钯酸水溶液；所述的Au@Ag‑Pd NDRs 为金银钯合金纳米棒，所述的金银钯合金纳米棒为金@银钯核壳枝晶状的纳米棒，所述金@银钯核壳枝晶状的纳米棒是以棒状金纳米粒子为核、以枝晶状银钯合金纳米粒子为壳层的核壳结构的纳米粒子，所述纳米棒的长度为20~50nm；所述的EDC/NHS为1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐EDC和N‑羟基丁二酰亚胺NHS的混合溶液，所述混合溶液中EDC的浓度为0.01mol/L，NHS的浓度为0.002mol/L。