一种筛选人组成型雄烷受体激活剂的方法

摘要

本发明公开了一种筛选人组成型雄烷受体激活剂的方法，尤其是以纳米二氧化铈颗粒增敏剂快速筛选人组成型雄烷受体激活剂的方法。以纳米二氧化铈为增敏剂，将纳米二氧化铈颗粒掺入鼠尾胶原溶液包被细胞培养板，将人肝癌细胞系HepG2接种于包被的培养板上，采用常规报告基因试验，即可筛选出人组成型雄烷受体激活剂，该方法简单、快速，具有很高的特异性，可以用于工业原料化学品、小分子化学药、农药等化学物是否人组成型雄烷受体激活剂的快速筛选，有很高的应用价值。

主权项

一种筛选人组成型雄烷受体激活剂的方法，其特征在于包括如下步骤：1)使用浓度为130μg/mL的N‑环己基‑N′‑(2‑吗啉乙基)氨基氰甲代对甲苯磺酸盐水溶液稀释I型鼠尾胶原至100μg/mL；2)向配制好的鼠尾胶原溶液中掺入一定浓度的纳米二氧化铈颗粒作为增敏剂，然后加入24孔细胞培养板中，37℃，5％二氧化碳浓度中放置3～4h，使用灭菌水和磷酸盐缓冲液漂洗，备用；3)将人肝癌细胞HepG2接种于包被的24孔细胞培养板上；12h后进行多质粒共转染；转染24h后，加入环境污染化学物，作用24h后进行检测筛选；所述多质粒为hCAR表达质粒、萤火虫萤光素酶报告基因质粒和内参比海肾萤光素酶质粒。