发明名称 |
一种表达纤维素外切酶和内切酶双活性蛋白构建纤维素酶高产菌株的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种表达纤维素外切酶和内切酶双活性蛋白构建纤维素酶高产菌株的方法,属于酶工程领域。该方法为通过同源重组和基因工程技术将具有纤维素外切酶和内切酶双活性蛋白的编码基因整合到黑曲霉热激蛋白基因的位置。首先合成核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的同源重组片段,用<i>Sal</i>I酶切该重组片段和pWM1质粒再连接转化DH5α得到同源重组质粒;用该同源重组质粒转化农杆菌,通过农杆菌介导转化得到纤维素酶高产黑曲霉菌株。本发明利用热激表达实现了通过提高温度大幅度增加目的蛋白的表达,从而更显著的提高纤维素外切酶和内切酶的活性,增加纤维素酶的酶活。 |
申请公布号 |
CN104480139A |
申请公布日期 |
2015.04.01 |
申请号 |
CN201410824320.9 |
申请日期 |
2014.12.26 |
申请人 |
湖北工业大学 |
发明人 |
薛栋升 |
分类号 |
C12N15/80(2006.01)I;C12N1/15(2006.01)I;C12R1/685(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/80(2006.01)I |
代理机构 |
武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 |
代理人 |
常海涛 |
主权项 |
一种表达纤维素外切酶和内切酶双活性蛋白构建纤维素酶高产黑曲霉菌株的方法,其特征在于:为将具有纤维素外切酶和内切酶双活性蛋白的编码基因整合到黑曲霉热激蛋白基因的位置。 |
地址 |
430068 湖北省武汉市武昌区南湖李家墩1村1号 |