一种同时测定牛奶中单诺沙星与氟甲喹的荧光方法

摘要

本发明涉及一种同时测定牛奶中单诺沙星与氟甲喹的荧光方法。首先收集具有代表性的已加入单诺沙星和氟甲喹的牛奶样本作为校正集，选择合适的荧光扫描条件，扫描得到校正样本集的荧光光谱图，其次以两种抗生素各自的浓度作为参照值，应用化学计量学技术，同时构建牛奶中单诺沙星和氟甲喹荧光光谱信息与其各自的浓度变量之间关系的多元校正模型，最后对未知单诺沙星和氟甲喹抗生素含量的牛奶样本进行荧光光谱扫描和得到特征光谱信息，利用已建立的定性和定量校正模型分别判断和计算两种抗生素的含量。本发明方法简单快速、准确性高、灵敏度高，可以有效解决牛奶的质量监控问题，使乳品安全得到保障。

主权项

一种同时测定牛奶中单诺沙星与氟甲喹的荧光方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)校正集样本的收集：在不含单诺沙星与氟甲喹的牛奶样本中加入不同量的单诺沙星与氟甲喹，使牛奶体系中单诺沙星的浓度在0‑56μgL^‑1范围内，氟甲喹的浓度在0‑100μgL^‑1范围内，加入三氯乙酸除去牛奶中蛋白质，收集澄清的校正集样本；所述的加入三氯乙酸除去牛奶中蛋白质的方法为加入浓度为0.5g/mL的三氯乙酸，至蛋白质沉淀，静置5min，离心，过滤；(2)校正集样本荧光光谱的测定：使用荧光分光光度计扫描样本，获取荧光光谱数据；荧光光谱数据的采集条件为：以320nm为激发波长，以330‑530nm为发射波长范围，以5nm为激发波长和发射波长的狭缝宽度，以1200nm/min为进行光谱扫描速度，每个样本作3次平行扫描，取平均扫描数据作为样本的荧光光谱数据；(3)校正模型的建立：利用多元校正化学计量学方法，分别构建校正集样本中单诺沙星与氟甲喹含量与荧光光谱数据之间关系的数学模型，用于样本单诺沙星与氟甲喹含量的预测并判断出阴性与阳性样品；所述的多元校正化学计量学方法为偏最小二乘法判别分析(PLS‑DA)和偏最小二乘法(PLS)，使用的计算机软件为Unscrambler软件；(4)校正模型的验证：取已知单诺沙星与氟甲喹含量的牛奶验证集样本，在与步骤(2)中相同条件下扫描获取荧光光谱数据，根据已建立的校正模型计算样本中单诺沙星与氟甲喹含量以及对阴性与阳性样本进行分类；(5)校正模型的应用:采集待测样本的荧光光谱数据，获取特征光谱信息，将该光谱信息输入已建立的校正模型中，筛选出阴性样本并计算出牛奶样本中单诺沙星与氟甲喹的含量。