用于TNT检测的氧化石墨烯光学生物传感器的制备方法

摘要

本发明公开了一种用于TNT（2,4,6-三硝基甲苯）检测的氧化石墨烯光学生物传感器的制备方法，将对TNT特异性敏感的多肽与氧化石墨烯纳米片共价交联，实现了多肽的TNT特异敏感性和氧化石墨烯独特光学性质的结合。该方法构建的交联多肽的氧化石墨烯生物传感器可稳定、简便地将TNT分子结合到氧化石墨烯纳米片表面，从而引起其光学性质的改变，导致传感器紫外吸收光谱发生变化，进而完成对目标分子TNT的检测。本发明制备的交联多肽的氧化石墨烯生物传感器灵敏度高，检测下限低，特异性强且稳定性好。

主权项

一种用于TNT检测的氧化石墨烯光学生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）氧化石墨烯纳米片分散液的配置：取氧化石墨烯粉末分散在去离子水中，获得1 mg/mL的氧化石墨烯分散液，然后进行冰水浴超声30分钟，再以3000 r.p.m.的速度离心30分钟，取上清液，即为良好分散的氧化石墨烯分散液；（2）将多肽固定在步骤1得到的氧化石墨烯分散液中的氧化石墨烯上，得到交联多肽的氧化石墨烯分散液，该步骤通过以下子步骤来实现：（2.1）在氧化石墨烯分散液中依次加入EDC（1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐）粉末和NHS（N‑羟基琥珀酰亚胺）粉末，所述氧化石墨烯、EDC粉末和NHS粉末质量比为1:1:1，然后冰水浴超声1小时，得到悬浊液；（2.2）向步骤2.1中得到的悬浊液中加入NaOH溶液调节液体pH至8.0；（2.3）人工合成TNT敏感的多肽，其氨基酸序列为WHWQRPLMPVSI，分散在浓度为0.1 M的磷酸缓冲盐溶液（PBS）中，得到浓度为250 mg/mL的多肽溶液；将该多肽溶液加入步骤2.2得到的pH为8.0的悬浊液中，悬浊液与多肽溶液的体积比为10:1，4 ℃避光静置过夜；（2.4）取出避光保存的液体并以13000 r.p.m.离心30分钟，取沉淀，用去离子水重复冲洗3次，再重新分散在去离子水中，即可获得交联多肽的氧化石墨烯分散液，将该分散液加入光谱仪即组成本发明用于TNT检测的氧化石墨烯光学生物传感器，分散液平时置于4 ℃条件下备用。