发明名称 一种编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用
摘要 本发明公开了一种具有编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用,对指孢囊菌(<i>Dactylosporangium</i><i>sp</i>.<i></i>RH1)中反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶(GenBankID:BAA20094.1)基因密码子进行优化获得<i>p4hyd</i>基因,对优化后<i>p4hyd</i>基因进行截短,获得<i>P4Hyd<sub>1-257</sub></i>基因,分别构建重组质粒pET-M-3C-P4Hyd和pET-M-3C-P4Hyd<sub>1-257</sub>,通过大肠杆菌进行原核表达,以菌体作酶源转化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。实验结果表明,以L-脯氨酸为底物,相比于pET-M-3C-P4Hyd,pET-M-3C-P4Hyd<sub>1-257</sub>转化生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的最高转化率由91.4%提高到97.4%,转化反应时间由80小时缩短到60小时,转化率得到明显提高,转化时间明显缩短。本发明可用于生物转化法生产L-羟脯氨酸,具有较好的工业应用前景。
申请公布号 CN103275998B 申请公布日期 2015.03.04
申请号 CN201310235337.6 申请日期 2013.06.14
申请人 河北博伦特药业有限公司;河北师范大学 发明人 李玮;张金秀;王立安;李天云;陈娇娇;鞠建松;薛张伟;张琳琳;张庆
分类号 C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P13/24(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12N15/53(2006.01)I
代理机构 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 代理人 张素静
主权项 一种编码高活性反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸羟化酶的基因片段,其特征在于该片段的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
地址 052260 河北省石家庄市晋州市马于工业园区