发明名称 |
一种编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用 |
摘要 |
本发明公开了一种具有编码高活性反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶的基因片段及其应用,对指孢囊菌(<i>Dactylosporangium</i><i>sp</i>.<i></i>RH1)中反式-4-羟基-L-脯氨酸羟化酶(GenBankID:BAA20094.1)基因密码子进行优化获得<i>p4hyd</i>基因,对优化后<i>p4hyd</i>基因进行截短,获得<i>P4Hyd<sub>1-257</sub></i>基因,分别构建重组质粒pET-M-3C-P4Hyd和pET-M-3C-P4Hyd<sub>1-257</sub>,通过大肠杆菌进行原核表达,以菌体作酶源转化生产反式-4-羟基-L-脯氨酸。实验结果表明,以L-脯氨酸为底物,相比于pET-M-3C-P4Hyd,pET-M-3C-P4Hyd<sub>1-257</sub>转化生成反式-4-羟基-L-脯氨酸的最高转化率由91.4%提高到97.4%,转化反应时间由80小时缩短到60小时,转化率得到明显提高,转化时间明显缩短。本发明可用于生物转化法生产L-羟脯氨酸,具有较好的工业应用前景。 |
申请公布号 |
CN103275998B |
申请公布日期 |
2015.03.04 |
申请号 |
CN201310235337.6 |
申请日期 |
2013.06.14 |
申请人 |
河北博伦特药业有限公司;河北师范大学 |
发明人 |
李玮;张金秀;王立安;李天云;陈娇娇;鞠建松;薛张伟;张琳琳;张庆 |
分类号 |
C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12P13/24(2006.01)I;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12N15/53(2006.01)I |
代理机构 |
石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 |
代理人 |
张素静 |
主权项 |
一种编码高活性反式‑4‑羟基‑L‑脯氨酸羟化酶的基因片段,其特征在于该片段的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。 |
地址 |
052260 河北省石家庄市晋州市马于工业园区 |