一种单分子核酸芯片的制作方法

摘要

本发明公开一种生物技术领域制备单分子核酸芯片的制作方法，该方法在获得大量各携带有一个自由活性基团的短链核酸分子的微纳米珠和空微纳米珠混合物后，将混合物沉降到基底表面，在使核酸分子上标记的活性基团与基片表面携带的活性基团发生连接反应时，利用微纳米珠空间位阻作用限制短链核酸分子在向基底固定时过于接近，保证相邻核酸分子间距不小于光学分辨极限，利用外力使未与基底连接的复合物及空微纳米珠脱离基底表面，如此反复沉降与脱离，直至基底铺满一层连接的复合物，最后，解离微纳米珠，获得单分子核酸芯片。本发明提供快速、简便制备确保95%的样点是一个分子的高通量单分子生物芯片。

主权项

一种制备单分子核酸芯片的制作方法，其特征在于，该方法在获得大量各携带有一个自由活性基团的短链核酸分子的微纳米珠即目的复合物和空微纳米珠混合物后，将混合物沉降到基底表面，在使核酸分子上标记的活性基团与基片表面携带的活性基团发生连接反应时，利用微纳米珠空间位阻作用限制短链核酸分子在向基底固定时过于接近，保证相邻核酸分子间距不小于光学分辨极限，利用外力使未与基底连接的目的复合物及空微纳米珠脱离基底表面，如此反复沉降与脱离，直至基底铺满一层连接的目的复合物，最后，解离与基底连接的微纳米珠，获得单分子核酸芯片； 所述的微纳米珠上携带的核酸分子条数是指根据纳米珠直径、Poisson公式及芯片上的预期单分子纯度计算获得的最大值；若纳米珠直径为700nm，为保证芯片样点间距为不小于500nm，核酸分子长度最长为42nt，当芯片上的预期单分子纯度为98％时，纳米珠上携带的核酸分子条数≦6；若微米珠直径为2000nm，核酸分子长度为42nt，当芯片上的预期单分子纯度为80％时，纳米珠上携带的核酸分子条数≦28。