一种在线二维串联色谱技术同时分离四种玫瑰红景天黄酮的方法

摘要

一种在线二维色谱(串联液相色谱和高速逆流色谱)分离纯化四种玫瑰红景天黄酮的方法，通过离子液体水溶液作提取剂对玫瑰红景天黄酮进行在线超声提取和液固吸附色谱富集，对富集后的玫瑰红景天黄酮进行在线洗脱，然后直接对被洗脱的玫瑰红景天黄酮进行在线高速逆流色谱分离得到纯度超过95％的四种黄酮单体。本方法将提取、柱色谱和高速逆流色谱串联，避免了繁琐的溶剂萃取和反复柱色谱过程，分离方法简单、分离效率和产品的纯度高。

主权项

一种在线二维色谱技术分离玫瑰红景天四种黄酮化合物的方法，其特征是，包括以下工艺步骤：(1)在线提取和富集：玫瑰红景天取粉碎后，加入0.5‑3mol/L的离子液体水溶液在20‑60℃，0.2‑1kw功率，30‑180min超声提取玫瑰红景天黄酮；同时，在0.5‑3柱体积(BV)/h流速下，提取液在线流过固相萃取柱富集玫瑰红景天黄酮；(2)在线洗脱和洗脱后的分离：将步骤(1)的固相萃取柱依次用平衡后的高速逆流色谱的溶剂系统‑乙酸乙酯‑正丁醇‑水的下相和上相进行洗脱，溶剂体积比在3∶2∶5‑4∶1∶5，洗脱体积分别为0.5‑1个柱体积和1‑2.5个柱体积，洗脱流速为0.5‑4BV/h，在线收集上相洗脱液；(3)在线分离：上相的洗脱液直接注入高速逆流色谱柱进行分离，分离参数为流动相流速为0.5‑3ml/min，转速为700‑900rpm，溶剂系统为乙酸乙酯‑正丁醇‑水(下相为流动相，上相为固定相)，溶剂体积比在3∶2∶5‑4∶1∶5，检测波长280nm，根据逆流色谱图在线采集分离成分。(4)后处理：取步骤(3)所得的分离成分，在40～60℃蒸馏浓缩干燥得到高纯度玫瑰红景天黄酮单体。