一种诱导人成纤维细胞重编程成骨细胞的方法

摘要

本发明涉及了一种将人成纤维细胞重编程并诱导成骨细胞的方法，它包括：解冻复苏成纤维细胞，待细胞生长至对数期后利用5μM reversine处理人成纤维细胞4d，之后利用成骨细胞诱导液进行诱导，7d后可将其诱导为成骨细胞的方法。本发明可以简单快速地获得成骨细胞，本发明为基础研究带来便捷，为临床应用带来前景。

主权项

一种诱导人成纤维细胞重编程成骨细胞的方法，其特征在于，步骤如下：（1）人成纤维细胞经reversine处理将人成纤维细胞密度调整为1×10⁵个细胞/ml，接种于6孔板中，待细胞生长至对数期后利用5μM的reversine处理成纤维细胞4天后，细胞的形态由原来的长梭型变为扁平，细胞间隙不明显，紧贴在培养板上，细胞的大小变成原细胞两或多倍，具有双核或多核；（2）利用成骨细胞诱导液诱导成骨细胞将reversine处理前后的成纤维细胞的培养基弃去，更换为成骨细胞诱导培养液，此后，每隔23天更换一次培养液，持续诱导7天，其中所述诱导培养液为1×10^‑2Mβ‑甘油磷酸 + 50mg/L Vc + ×10^‑7M地塞米松 + 10%FBS + 低糖‑DMEM培养基。