一种巨大芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺

摘要

本发明涉及一种巨大芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，巨大芽孢杆菌经一、二级种子扩大培养后接入发酵培养基中培养，在发酵过程中通过补料流加碳源增加芽孢杆菌的数量和转化率，显著提高单位产量，降低了单位成本；结束发酵，使用真空薄膜浓缩器浓缩发酵液，发酵液中的可溶性增效物质、促生物质、抑菌活性物质能有效回收；浓缩发酵液用多级低温喷雾流化干燥设备干燥造粒，分选颗粒，旋风分离器捕集细粉返回再造粒，得每克菌粉CFU不少于8.0×10¹⁰个的巨大芽孢杆菌产品。尾气处理，达标排放。本发明能最大程度保留发酵液中有效物质，产品质量高、设备利用率高，生物活性保持的比较好，废气，废水达标排放，能大规模产业化生产。

主权项

一种巨大芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，其特征在于具体步骤如下：1)一级种子培养：5000ml三角瓶中装有2000ml一级种子培养基，115℃‑121℃湿热灭菌15‑30min，取10ml巨大芽孢杆菌冻干管菌种接种于一级种子培养基中，在28℃‑30℃培养10～12h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖0.5％‑2.5％，牛肉膏0.5％‑3％，蛋白胨0.5％‑3％，培养基pH为6.5‑7.5；2)二级种子培养：在400L发酵罐中装有150L或300L二级种子培养基，115℃‑121℃湿热灭菌15‑30min，将3000ml一级种子接种于二级种子培养基中；在28℃‑30℃培养10～12h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖0.5％‑2.5％，酵母抽提物0.5％‑3％，蛋白胨0.5％‑3％，磷酸氢二钾0.02％‑0.05％，硫酸镁0.02％‑0.1％，培养基pH调为6.5‑7.5；3)发酵：在5m³或40m³发酵罐中装有或4000L或30m³巨大芽孢杆菌发酵培养基，115℃‑121℃湿热灭菌15‑30min，将150L或300L二级种子接种于巨大芽孢杆菌发酵培养基中，控制罐压0.02Mpa‑0.05Mpa，在28℃‑30℃培养40‑48h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖1％‑2％，豆粕1％‑4％，玉米浆1％‑4％，酵母粉1％‑4％，磷酸氢二钾0.01％‑0.05％，硫酸镁0.1％‑0.2％，硫酸锰0.002％，培养基pH为6.5‑7.5；4)补料：当发酵至12‑18h开始流加由葡萄糖60％，水40％配制成的葡萄糖补料培养基，发酵至38‑42小时结束；5)至芽孢形成率大于等于90％时，结束发酵；6)将发酵液加热到35℃‑60℃时进入浓缩器，在真空度为‑70kpa～‑95kpa下进行浓缩，浓缩至含固量达到10％‑25％时，开始出料；7)浓缩发酵液用多级低温喷雾流化干燥设备进行干燥造粒，颗粒经过分选，符合颗粒要求直接出塔，得CFU不少于8.0×10¹⁰个的巨大芽孢杆菌产品；所述进风温度130℃‑180℃，出口温度60℃‑80℃；8)尾气处理：采用化学氧化、等离子照射或紫外照射去味、脱氨氮或脱硫化氢处理后排放。