发明名称 | 一种快速灵敏检测小分子RNA的方法 | ||
摘要 | 本发明公开了一种快速灵敏检测小分子RNA的方法,属于分子生物领域,包括以下步骤:(1)提取、纯化待检测小分子RNA;(2)探针设计:探针用生物素或地高辛进行标记;(3)液相杂交:将所述待检测小分子RNA与所述探针在缓冲液中进行杂交,用外切酶切除未杂交的多余单链后进行凝胶电泳;(4)转膜:将电泳后的凝胶上的杂交产物转移到固相支持物(如尼龙膜,纤维素膜)上;(5)抗体孵育:将步骤(4)所得到的含有杂交产物的固相支持物与特异性抗体进行孵育杂交;(6)信号检测。本方法最低可以检测0.005fmol的miRNA,灵敏度比现有技术提高了至少10倍。本方法检测速度快,可实现高通量检测和定量检测。 | ||
申请公布号 | CN104232772A | 申请公布日期 | 2014.12.24 |
申请号 | CN201410471164.2 | 申请日期 | 2014.09.16 |
申请人 | 四川大学 | 发明人 | 王胜华;毛强;詹诚 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 北京国林贸知识产权代理有限公司 11001 | 代理人 | 胡琳梅 |
主权项 | 一种快速灵敏检测小分子RNA的方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)提取、纯化待检测小分子RNA;(2)探针设计:根据待检测小分子RNA的碱基序列设计探针,所述探针用生物素或地高辛进行标记;(3)液相杂交:将所述待检测小分子RNA与所述探针在缓冲液中进行杂交,并消化掉未杂交的单链序列,然后进行凝胶电泳;(4)转膜:将电泳后的凝胶上的杂交产物转移到固相支持物上;(5)抗体孵育:将步骤(4)所得到的含有杂交产物的固相支持物与特异性抗体进行孵育杂交;(6)信号检测:检测步骤(5)所得的固相支持物上的信号。 | ||
地址 | 610065 四川省成都市一环路南一段24号 |