铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用

摘要

本发明提供铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法及应用，其方法为：将铁皮石斛粉加入缓冲溶液,硫酸氨沉淀,透析冷冻干燥，得蛋白质粉末；再溶解,配成铁皮石斛蛋白液,分别加入3种蛋白酶，即碱性蛋白酶Alcalase2.4L、碱性蛋白酶37017和胰蛋白酶,酶解,得三种酶解液；进行凝胶色谱柱层析，水洗脱，收集得到9个多肽组分，即铁皮石斛抗肿瘤多肽。所得产品A3对肝癌细胞HepG-2、胃癌细胞SGC-7901和乳腺癌细胞MCF-7的半抑制浓度IC50分别为：169.62µg/mL、155.20µg/mL、107.53µg/mL。本发明得到的铁皮石斛多肽有利于功能食品和医药领域的开发利用。

主权项

铁皮石斛抗肿瘤多肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：（1）将铁皮石斛粉加入缓冲溶液PBS中浸泡提取蛋白, 硫酸氨沉淀,透析冷冻干燥，得到蛋白质粉末；（2）取步骤（1）所得蛋白质粉末溶解于蒸馏水, 配成铁皮石斛蛋白液, 分别加入3种蛋白酶，即碱性蛋白酶Alcalase 2.4L、碱性蛋白酶37017和胰蛋白酶, 在控制条件下进行酶解, 得到三种酶解液；（3）取步骤（2）得到的三种酶解液,再进行凝胶色谱葡聚糖凝胶Sephadex G‑25柱层析，水洗脱，在检测波长280nm下收集得到9个多肽组分，即铁皮石斛抗肿瘤多肽。