一种病理尸检过敏性休克的免疫荧光诊断方法及试剂盒

摘要

本发明提供一种病理尸检过敏性休克的免疫荧光诊断方法，通过免疫荧光双标技术对IgE与肥大细胞（MC）脱颗粒进行免疫荧光共定位；其试剂盒包括：与人类胰蛋白酶结合的第一重标记第一抗体，该第一抗体是特异性结合人类胰蛋白酶的鼠源性单克隆抗体；与人IgE结合的第二重标记第一抗体，该第一抗体是特异性结合人IgE的兔源性多克隆抗体；FITC以及Cy3标记的荧光二抗；抗原修复试剂；DAPI细胞核染色剂及缓冲液系统等。该试剂盒有特异性好、灵敏度高、稳定、通用的特点。主要应用于病理学与法医病理学的鉴定中，能精准地提供过敏性休克直观的病理学依据。

主权项

一种病理尸检过敏性休克的免疫荧光诊断方法，其特征在于：步骤一：制作组织片；步骤二：抗原修复：先将抗原修复试剂放入高压锅，煮沸后将组织片放入，冒气后2分钟关火，从高压锅取出组织片及抗原修复试剂，自然冷却至室温；步骤三：采用PBS缓冲液洗3分钟, 共计3次；步骤四：滴加第一抗体混合液在组织片上，将组织片放入湿盒，在4℃冰箱内保持8‑12小时；步骤五：将组织片放在PBS缓冲液洗5分钟，共计3次；步骤六：将组织片滴加荧光二抗1和2的混合液，室温孵育30分钟；步骤七: 将组织片放在PBS缓冲液洗5分钟，共计3次；步骤八：滴加DAPI 细胞核染色剂，在荧光显微镜下观察。