一种柱层析法制备高纯甘油磷脂酰乙醇胺的方法

摘要

本发明公开了一种柱层析法制备高纯甘油磷脂酰乙醇胺(L-alpha glycerylphosphorylethanolamine，L-α-GPE)的方法，属于磷脂深加工技术领域。本发明采用甲醇钠催化大豆粉末磷脂在无水甲醇体系中反应制备出含甘油磷脂酰乙醇胺的混合液，调节pH后，先后经过可在非水介质中使用的强阳离子交换树脂(无水醇相平衡)层析柱和强阴离子交换树脂(水平衡)层析柱，采用特定的解吸液解吸，最终将解吸液减压蒸馏，所得浅黄色透明黏稠状液体即为甘油磷脂酰乙醇胺产品。柱层析法所得产品纯度很高，成本较低，并可以同时分离出纯度较高的甘油磷脂酰胆碱，工艺简单，可以适用于工业生产。本发明拓展了磷脂深加工产品的应用范围，可以为甘油磷脂酰乙醇胺的工业生产奠定基础。

主权项

一种柱层析法制备高纯甘油磷脂酰乙醇胺(L‑alpha glycerylphosphorylethanolamine，L‑α‑GPE)的方法，是以大豆粉末磷脂为原料，利用离子交换树脂柱层析法纯化分离出L‑α‑GPE的方法；在醇相体系中，采用甲醇钠催化粉末磷脂进行化学醇解反应；醇解混合液调节pH后，首先将醇解混合液上样至在非水介质中稳定性较好的强阳离子交换树脂层析柱，使用无水醇相平衡，在流速为1～2mL/min的流速下，经过吸附、甲醇洗脱及水解吸的先后程序，将L‑α‑GPC和L‑α‑GPE从醇解混合液中分离出来；接着将L‑α‑GPC和L‑α‑GPE的混合液经过强阴离子交换树脂层析柱，采用水平衡，在1～2mL/min的流速下经过柱的吸附与特定解吸液的解吸，将L‑α‑GPE从柱中解吸出来，最后经过减压蒸馏和真空干燥，得到浅黄色透明高黏度液体，即为甘油磷脂酰乙醇胺产品，其纯度可达98％以上；其特征在于具体步骤为：(1)化学醇解法反应制备L‑α‑GPE：将粉末磷脂加入无水甲醇体系中，固液比1∶2～1∶10(g/ml)，0～70℃油浴中搅拌均匀后，加入1％～5％的甲醇钠催化剂，反应2～20h，过滤，所得清液即为含有L‑α‑GPE的醇解混合液；(2)醇解混合液调节至适当pH后，上样至甲醇平衡的在醇相中稳定性较好的强酸型阳离子交换树脂层析柱，先用甲醇冲洗至柱中无杂质，然后采用中性的水对柱进行解吸，所得解吸液中主要成分为L‑α‑GPE和L‑α‑GPC，将L‑α‑GPE和L‑α‑GPC从混合液中分离出来；(3)上述解吸液再经过水平衡的强阴离子交换树脂层析柱，先用水冲洗至L‑α‑GPC完全流出，然后采用1％乙酸对柱进行解吸，所得解吸液于60℃下减压蒸馏，得到浅黄色透明高黏度液体，即为L‑α‑GPE产品。