发明名称 一种乳腺上皮细胞的体外培养方法
摘要 本发明公开了一种乳腺上皮细胞的体外培养方法。它是将乳腺组织先用组织匀浆机处理成乳糜状的组织块,然后将组织块依次接种在标定的培养瓶底壁处进行培养,2-3天后每个组织块周围有成纤维细胞游离出来并贴壁生长,4-5天后上皮细胞开始游离出来贴壁生长,成纤维细胞被驱向上皮细胞外周并围绕其生长;这时加入胰蛋白酶将贴壁的成纤维细胞消化下来,终止消化后继续培养,5-7天后有约80-90%细胞贴壁,得到较高纯度的乳腺上皮细胞。与现有的培养方法相比,该方法在培养初期对成纤维细胞进行消化处理,这时仅有少量的上皮细胞游离生长(消化处理时可完全去掉),之后游离生长的上皮细胞不受消化处理损伤,细胞活性和纯度都非常高。
申请公布号 CN104195100A 申请公布日期 2014.12.10
申请号 CN201410438103.6 申请日期 2014.08.29
申请人 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 发明人 游伟;谭秀文;赵红波;刘晓牧;刘桂芬;成海建;刘倚帆;万发春;宋恩亮
分类号 C12N5/071(2010.01)I 主分类号 C12N5/071(2010.01)I
代理机构 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 代理人 韩百翠
主权项 一种乳腺上皮细胞的体外培养方法,其特征是,将乳腺组织先用组织匀浆机处理成乳糜状的组织块,然后将组织块依次接种在标定的培养瓶底壁处进行培养;2‑3天后每个组织块周围有成纤维细胞游离出来并贴壁生长,4‑5天后上皮细胞开始游离出来贴壁生长,成纤维细胞被驱向上皮细胞外周并围绕其生长;这时加入0.25%胰蛋白酶将贴壁的成纤维细胞消化下来,终止消化后继续培养,5‑7天后有80‑90%细胞贴壁,得到较高纯度的乳腺上皮细胞。
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