银杏内酯注射液及含量测定方法

摘要

本发明涉及植物提取领域，具体涉及一种治疗心脑血管疾病的银杏内酯注射液的检测方法和其中有效成分含量的测定方法，所测定的银杏内酯注射液每1ml含银杏萜类内酯以白果内酯(C₁₅H₁₈O₈)、银杏内酯A(C₂₀H₂₄O₉)、银杏内酯B(C₂₀H₂₄O₁₀)和银杏内酯C(C₂₀H₂₄O₁₁)的总量计，含量为1-10mg/ml，优选4.25～5.75mg。

主权项

银杏内酯注射液的检测方法，所述的银杏内酯注射液含有下述成分：其特征在于检测的项目和方法如下：(1)蛋白质：取银杏内酯注射液2ml，加水制成50ml，作为供试品溶液，称取考马斯亮蓝G‑250约50mg，溶于25ml乙醇中，再加入85％(w/v)的磷酸50ml，加水稀释至500ml，摇匀，过滤，精密量取滤液5ml置试管中，再加入1ml供试品溶液，摇匀，放置3min，同法做空白，于595nm波长下，测定吸光度，供试品溶液吸光度小于0.05；(2)鞣质：取蛋白质检查项供试品溶液1ml加入稀醋酸1滴，再加明胶氯化钠试液5滴，摇匀，放置10分钟，未出现浑浊或沉淀；(3)树脂：取蛋白质检查项供试品溶液5ml，加盐酸1滴，放置30分钟，无树脂状物质析出；(4)草酸盐：取蛋白质检查项供试品溶液2ml，用稀盐酸调节pH值至1～2，滤过，滤液用氨水调节pH值为5～6，加3％氯化钙溶液3滴，放置10分钟，未出现浑浊或沉淀；(5)钾离子：取蛋白质检查项供试品溶液2ml，置10ml纳氏比色管中，加碱性甲醛溶液0.6ml、3％EDTA溶液2滴、3％四苯硼钠溶液0.5ml，加水稀释至10ml，另取标准氯化钾溶液0.8ml，同法试验，浊度低于对照溶液；(6)有效成分含量的测定方法：色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以25∶10∶65甲醇‑四氢呋喃‑水为流动相；用蒸发光散射检测器，漂移管温度：105℃；载气流速：3.00L/min；柱温：40℃；理论板数按白果内酯峰计算应不低于2500，白果内酯峰与银杏内酯C峰的分离度应大于1.5；对照品溶液的制备：分别精密称取白果内酯对照品、银杏内酯A对照品、银杏内酯B对照品、银杏内酯C对照品适量，加甲醇制成每1ml分别含0.15mg、0.12mg、0.1mg、0.1mg的混合溶液，摇匀，作为对照品溶液；供试品溶液的制备：精密量取银杏内酯注射液1ml，加磷酸盐缓冲溶液14ml，摇匀，上Extrelut‑20柱，吸附15分钟，用乙酸乙酯100ml洗脱，收集洗脱液，于水浴上蒸干，残渣用流动相溶解并转移至10ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液；测定法：分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl和供试品溶液15μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，用外标两点法对数方程分别计算白果内酯、银杏内酯A、银杏内酯B和银杏内酯C的含量。