一种从鲜奶中高效提取核酸的方法

摘要

本发明涉及一种从鲜奶中高效提取核酸的方法，属生物工程应用技术领域，其特征在于包括如下步骤：（1）、二次向鲜奶样品中加入生理盐水，经混合离心后，弃去脂肪层和上层液体，得沉淀A；（2）、向沉淀A中加入TES溶液、盐酸胍溶液和蛋白酶K溶液；经水浴后室温冷却，再加入Tris饱和酚，经抽提离心后，取上清液B；（3）、向上清液B中加入乙酸钠溶液和异丙醇，经混合离心后，弃上清，得核酸溶于双蒸水中，-20℃保存备用。本发明能有效地排除脂肪和蛋白质对核酸提取的影响，具有从多种鲜奶中方便有效地提取核酸、提取核酸的浓度和纯度高、方法简单的特点。

主权项

一种从鲜奶中高效提取核酸的方法，其特征在于包括如下步骤：（1）、取鲜奶样品，向鲜奶样品中加入其体积50%的生理盐水，混合均匀，13000转/分钟、4℃离心10分钟，弃去脂肪层和上层液体；再向余下的液体中加入鲜奶样品等体积的生理盐水，混合均匀，13000转/分钟、4℃离心10分钟，弃去脂肪层和上层液体，得沉淀A；（2）、向沉淀A中加入86%鲜奶样品体积的TES溶液、10%鲜奶样品体积的盐酸胍溶液和4%鲜奶样品体积的蛋白酶K溶液；50℃水浴12小时，室温冷却，再加入50%鲜奶样品体积的Tris饱和酚，抽提10分钟，13000转/分钟、4℃离心5分钟，取上清液B，弃沉淀；（3）、取上清液B，向上清液B中加入10%上清液B体积的乙酸钠溶液和80%上清液B体积的异丙醇，混合均匀，沉淀核酸，13000转/分钟、4℃离心10分钟，弃上清，得核酸溶于10%鲜奶样品体积的双蒸水中，‑20℃保存备用。