基于多基因的丙型流感病毒实时荧光定量RT-PCR检测试剂

摘要

本发明涉及一种基于多基因的丙型流感病毒实时荧光定量RT-PCR（real-time RT-PCR，rRT-PCR）检测试剂,包括对丙型流感病毒HE基因相对保守区域、丙型流感病毒NP基因相对保守区、针对丙型流感病毒MP基因相对保守区和针对丙型流感病毒NS基因相对保守区的4套特异性引物对及探针序列，同时公开了待检测样本的处理、rRT-PCR反应体系及反应条件、结果分析，能快速通过rRT-PCR法检测丙型流感病毒，且在丙型流感病毒变异较小的情况下，4套引物及探针检测均为阳性，如果丙型流感病毒发生较大变异，可能仅出现1套～3套引物及探针阳性，可以有效的为临床诊断、检验检疫等领域的预警机制提供可行的技术支持。

主权项

基于多基因的丙型流感病毒实时荧光定量RT‑PCR检测引物和探针，包括丙型流感病毒特异性引物和探针，其特征在于，所述丙型流感病毒特异性引物和探针包括丙型流感病毒HE基因特异性引物和探针、丙型流感病毒NP基因特异性引物和探针、丙型流感病毒MP基因特异性引物和探针及丙型流感病毒NS基因特异性引物和探针；其中，针对HE基因和MP基因的探针与目的基因负链的碱基序列一致，针对NP基因和NS基因的探针与目的基因正链的碱基序列一致；所述丙型流感病毒HE基因特异性引物和探针为：正向引物(SEQ ID NO.1)：5'‑YGGAGGAAATTTRTATGC‑3'，反向引物(SEQ ID NO.2)：5'‑GCCRATCCATGTACTTTG‑3'，探针(SEQ ID NO.3)：5'‑FAM‑TTCAAGACRGARGCTCCAGC‑BHQ1‑3'；所述丙型流感病毒NP基因特异性引物和探针为：正向引物(SEQ ID NO.4)：5'‑RAGGGAAAAGAAAGCAAG‑3'，反向引物(SEQ ID NO.5)：5'‑CTGCRTGGTAGGTTATATTG‑3'，探针(SEQ ID NO.6)：5'‑FAM‑AGCRGACAGYAACTTCAACGC‑BHQ1‑3'；丙型流感病毒MP基因特异性引物和探针为：正向引物(SEQ ID NO.7)：5'‑GACCACAATTATGCCTGAA‑3'，反向引物(SEQ ID NO.8)：5'‑TGGTGAGTTGTCGGTTTC‑3'，探针(SEQ ID NO.9)：5'‑FAM‑TCTCCCAGGTCAAGTCTCTCCC‑BHQ1‑3'；丙型流感病毒NS基因特异性引物和探针为：正向引物(SEQ ID NO.10)：5'‑CGTAGAAATGAAGGGRAAG‑3'，反向引物(SEQ ID NO.11)：5'‑CTCCACGATGATGATACA‑3'，探针(SEQ ID NO.12)：5'‑FAM‑CTCCAAGCAACATAGCACCAATT‑BHQ1‑3'。