一种制备宝霍苷I纯品的方法

摘要

本发明涉及一种制备宝霍苷I纯品的方法。以实验室自制的淫羊藿苷(纯度大于98％)为原料，经过葡聚糖酶水解，得到含量大于90％的宝霍苷I粗品，用反相高效制备色谱作为纯化手段，得到纯度大于98％的宝霍苷I纯品。本发明工艺步骤简单、纯度高、成本低，并且可大规模生产。

主权项

一种宝霍苷I纯品的制备方法，其特征在于：以淫羊藿苷为原料，葡聚糖酶水解及反相高效制备色谱纯化，即可获得纯度大于98％的宝霍苷I纯品；具体步骤如下：1)葡聚糖酶水解：将1‑25mg淫羊藿苷用10‑100ml柠檬酸缓冲溶液溶解，加入40‑150ul、4‑10ug/ul的葡聚糖酶水溶液，保持19‑80摄氏度并搅拌3‑6小时，获得宝霍苷I沉淀；宝霍苷I沉淀经水洗除去部分酶和大部分葡萄糖，进一步用‑4到4摄氏度冷甲醇溶解除去残余酶和不溶沉淀，上清液浓缩干燥即可得到宝霍苷I粗品；2)反相高效制备液相纯化：宝霍苷I粗品用甲醇溶解，经0.45um微膜过滤；通过微膜滤出的样品上样分析，采用C18反相填料制备色谱柱分离纯化，采用C18键合硅胶填料，采用体积浓度70‑100％甲醇水溶液等度洗脱，采用紫外检测器检测，检测波长270nm，收集相应保留时间处馏分，浓缩干燥即得纯度大于98％的宝霍苷I纯品。