主权项 |
一种菊粉的高效液相检测方法,其特征在于,它包括如下步骤:(1)标准品和样品的准备:(1a)样品溶液的制备:将液体样品或固体样品用水溶解,冷却至室温,过滤或离心,收集滤液或上清液作为样品溶液;(1b)酶解样品溶液的制备:取部分步骤(1a)制备得到的样品溶液,加入醋酸缓冲溶液,再加入菊粉外切酶,加热进行酶解,冷却至室温,过滤或离心,收集滤液或上清液作为酶解样品溶液;(1c)标准品溶液的制备:以果糖、葡萄糖、蔗糖为标准品,分别用水配成的水溶液;(2)高效液相色谱检测:色谱条件:检测器:蒸发光散射检测器;色谱柱:waters XBridge Amide 5μm4.6×250mm Column;柱温:35℃;流速:1mL/min;进样量10~20μL;流动相:乙腈与水初始体积比为75:25,在0~35min之内,体积比等度梯度变化为50:50;将标准品溶液和酶解样品溶液及样品溶液分别进样;(3)计算和判断:(3a)酶解样品溶液按式I计算酶解样品溶液中的果糖和葡萄糖的百分含量:Xi=(Cst×Asa)/(Ast×W)×100 I其中:Xi=样品中果糖或葡萄糖占干物质的百分含量;Cst=标准品溶液中果糖或葡萄糖的含量,mg/100mL;Asa=样品溶液中果糖或葡萄糖高效液相峰面积;Ast=标准品溶液果糖或葡萄糖高效液相峰面积;W=样品溶液中样品以干物质计算的含量,mg/100mL;酶解样品溶液中,含有90%以上的果糖和10%以下的葡萄糖,则该样品为合格样品;(3b)样品溶液按式II计算果糖、葡萄糖和蔗糖中的每个组分糖占干物质的百分含量:Pi=Asa/ΣAsa×100 II其中:Pi=样品中组分i占干物质的百分含量;Asa=样品中组分i的峰面积;ΣAsa=样品中所有成分峰面积的总和;所述的组分i为果糖、葡萄糖和蔗糖中的任意一种;按式III计算样品中菊粉的百分含量:Inulin%=(1‑F‑G‑GF)×100 III其中:Inulin%=菊粉占干物质的百分含量;F=样品溶液中果糖占干物质的百分含量;G=样品溶液中葡萄糖占干物质的百分含量;GF=样品溶液中蔗糖占干物质的百分含量。 |