一种磁性荧光微球免疫层析定量检测方法

摘要

本发明公开了一种磁性荧光微球免疫层析定量检测方法。该方法充分利用磁性纳米粒子及量子点的各自优良特性，并结合免疫层析技术，在优化试纸条结构和组成材料的基础上，进而实现的荧光定量检测。本发明所述方法具有信号放大作用，且与常规胶体金免疫层析方法相比，具有标记稳定性好、非特异性低、灵敏度高、线性范围宽以及定量准确的优势。本发明提供了一种简便、准确、特异、价廉的检测工具，适用于血样、尿样、唾液、粪便等样本，因此可广泛应用于医学检验、食品安全、兽药残留、环境监测及毒品检测等领域。

主权项

一种磁性荧光微球免疫层析定量检测的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1)以磁性纳米粒子为主体，通过化学交联偶联量子点构建磁性‑荧光复合微球，该复合微球的球径为50～300nm，所用量子点的荧光发射波长范围为550～1300nm；步骤2)用化学交联分别将分析物对应的配体和质控分子偶联至磁性‑荧光复合微球表面，构成配体修饰的磁性‑荧光复合微球和质控分子修饰的磁性‑荧光复合微球，并将两种溶液混合，得到标记液；步骤3)以样品垫、层析膜、吸水垫、底板以及扣卡组装免疫层析所用试纸条，其中层析膜上设定有定量带和质控带，定量带固定有能与分析物结合或与步骤2)所述配体竞争结合分析物的配体，质控带固定有能与所述质控分子特异性结合的生物分子，且所述层析膜为弱荧光层析膜，底板和扣卡具有低荧光特性；步骤4)将标记液与样本混合，反应结束后进行磁分离，去上清并将富集物洗涤、复溶，获得富集液；步骤5)将富集液滴加于试纸条的样品垫处，进行免疫层析，当富集液流经定量带和质控带后，检测定量带和质控带的荧光信号强度，并以质控带荧光信号强度校正定量带的荧光信号强度，进而实现对目标分析物的定量检测；所述化学交联为量子点通过其表面活性基团和磁性纳米粒子或配体或质控分子直接联接，或者是量子点与纳米粒子或配体或质控分子通过1‑乙基‑3‑(3‑二甲基胺丙基)碳化二亚胺、N‑羟基琥珀酰亚胺、戊二醛交联剂联接。