一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法

摘要

一种取材便利、成本低、重复性好以及无畸形芽的利用大白菜球叶叶片获得再生植株的方法。其特征包括以下步骤：(1)选取结球期大白菜外部球叶，在无菌条件下消毒灭菌。(2)将灭菌后的叶片正面向上平置于芽诱导培养基上进行培养。(3)外植体在芽诱导培养基中培养28d后，转入MS基本培养基中继续培养。将外植体上长度大于1.5cm的再生不定芽切下，转入生根培养基诱导生根。(4)再生芽基部形成大量毛根后，将再生苗根部的生根培养基洗净，栽入盛有固体基质的塑料花盆中。本方法直接从田间生长植株取材，不需要经过种子萌发过程，对及时保存优良珍贵大白菜材料意义重大，同时为大白菜转基因育种研究提供稳定的受体新材料。

主权项

一种利用大白菜球叶获得再生植株的培养方法，其特征在于包括下列步骤：(1)选取结球期大白菜外部球叶，去掉叶柄，在无菌条件下，先用体积分数70％的酒精表面消毒30s，无菌水漂洗一遍，再倒入质量分数5％的NaClO溶液灭菌10min，无菌水轻轻漂洗15min，期间换水5‑6次，消毒完毕，然后用灭菌吸水纸将叶片残留水分吸干；(2)将灭菌后的叶片切分为边长1.5‑2.0cm的叶块，避开较粗叶脉，叶正面向上平置于芽诱导培养基上。在光照强度1500‑2000Lux，光周期16h/d，温度24±1℃条件下进行培养；(3)外植体在芽诱导培养基中培养28d，之后转入MS基本培养基中继续培养，将外植体上长度大于1.5cm的再生不定芽切下，转入生根培养基诱导生根，以上培养条件均为：光照强度1500‑2000Lux，光周期16h/d，温度24±1℃；(4)再生芽基部形成大量毛根后，打开培养瓶盖炼苗4‑5d，将再生苗根部的生根培养基洗净，栽入盛有固体基质的塑料花盆中，基质采用蛭石和草炭体积比1∶1混合而成，盆口用保鲜薄膜覆盖保湿，3d后，在薄膜表面打少量小孔，后期打孔数逐渐增加，孔隙逐渐加大，覆膜培养10d后，揭去保鲜薄膜，将再生植株置于室温下培养，基质栽培过程中，均给予自然光照。