一种DNA甲基化检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公布一种DNA甲基化检测试剂盒及其检测方法，该试剂盒通过制备具有石墨烯氧化物的玻片，根据特定基因序列设计甲基化检测探针，合成具有AuNP或者其他能淬灭石墨烯氧化物检测荧光的物质标记的单链DNA，并物理吸附到带有石墨烯氧化物点阵的玻片上，运用石墨烯氧化物吸附单链DNA，双链DNA脱离石墨烯氧化物的特性，实现高通量、低成本、准确、快速地对DNA甲基化的检测。

主权项

一种DNA甲基化检测试剂盒检测DNA甲基化的方法，其特征在于该方法用于非诊断目的，包括以下步骤：1)制备具有石墨烯氧化物点阵的玻片；2)待测DNA样本的制备：从组织中提取基因组DNA，以亚硫酸氢盐处理的基因组DNA，通过PCR扩增，制备待检测的DNA样本；3)检测探针吸附到具有石墨烯氧化物点阵的玻片：合成具有淬灭石墨烯氧化物检测荧光物质标记的DNA甲基化检测探针，该检测探针在杂交盒中和1)制备的玻片进行物理吸附12h，用PBS洗去多余的探针，扫描记录玻片上石墨烯氧化物点阵的荧光强度；4)DNA甲基化检测：在3)中加入2)中制备的DNA样本，在37℃下杂交60min，PBS冲洗后进行扫描，吸附具有淬灭石墨烯氧化物检测荧光物质标记的DNA甲基化检测探针时的石墨烯氧化物的荧光强度与加入DNA甲基化样本时的石墨烯氧化物荧光强度的比值来检测DNA甲基化。