制备肽缀合物和连接基的改进方法

摘要

本发明提供制备式5b的化合物及其中间体的方法，以及可用于制备这些和类似化合物的方法的新型化合物。

主权项

制备式5a的化合物的方法其包括(i)将9a和11一起在1‑丙基磷酸酐(T3P)的存在下反应，以生成化合物13a(ii)在至少约50％THF的THF:H₂O溶液中将化合物13a用Pd/C催化氢化，以制备式14a的化合物(iii)在基本上无碱的反应中，将14a在THF中的溶液与式15的化合物合并，以制备化合物6a(iv)在DCC的存在下，将式6a的化合物与式19a的化合物在THF中反应，以制备化合物20a(v)将20a与溶解于非质子极性第15溶剂中的包含ε‑氨基的肽2合并，以制备化合物3a(vi)将化合物3a在DMSO中溶解；(vii)将pH为约5.5至约7.5的组氨酸缓冲液加入至步骤(vi)的DMSO和3a的溶液中；(viii)将包含含有SEQ ID NO:5的轻链可变区和含有SEQ ID NO:6的重链可变区的抗体加入至步骤(vii)的溶液中，以使肽:抗体的摩尔比率为约1.8:1至约3:1；(ix)在约pH 5.5至约pH 7.5以及约5℃至35℃的温度下，以中等速度搅拌步骤(viii)中所形成的混合物，以避免反应混合物起泡，持续至少约1小时；(x)过滤(ix)中的溶液，以提取所得的肽‑连接基抗体缀合物5a，其中q＝1、2、3、4或5，X＝F或Cl，并且m＝3、4或5。