发明名称 一种区位选择性细菌硝基还原酶基因及其应用
摘要 本发明公开了一种突变型细菌硝基还原酶基因及其应用,属于酶工程领域。基于蛋白质三维结构及分子对接,发现大肠杆菌硝基还原酶NfsB中第124位苯丙氨酸通过与多硝基底物的侧链基团相互作用,从而影响底物在活性口袋中的定位。突变体F124W、N71S/F124W、F123A/F124W和N71S/F123A/F124W可催化癌症治疗前药CB1954专一性生成具有高生物毒性的4-NHOH产物。同时这些突变体较野生型酶相比催化活性提高了7-24倍,以N71S/F123A/F124W表现最为显著。本发明所提供的具有专一还原选择性的硝基还原酶突变体在癌症及其他疾病治疗方面具有良好的应用前景。
申请公布号 CN104099351A 申请公布日期 2014.10.15
申请号 CN201410336949.9 申请日期 2014.07.15
申请人 大连理工大学 发明人 杨君;白敬;刘培瑜;姜熙;杨青
分类号 C12N15/53(2006.01)I;C12N9/02(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I 主分类号 C12N15/53(2006.01)I
代理机构 大连东方专利代理有限责任公司 21212 代理人 贾汉生;李馨
主权项 一类区位选择性细菌硝基还原酶基因,其核苷酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4中的一种。
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