单管荧光PCR技术检测GJB2基因235delC突变的方法及其试剂盒

摘要

本发明提供一种利用荧光定量PCR技术检测耳聋基因GJB2235delC突变位点的方法及试剂盒。针对GJB2235delC突变位点，设计特异性突变型探针和野生型探针并分别标记不同颜色的荧光，在突变位点两侧设计扩增引物。对一个待测样本用含野生型探针、突变型探针及扩增引物的PCR反应体系进行扩增，通过与质控品比较荧光曲线模式分析样本的基因型，判断样本是否存在GJB2235delC突变。本发明能为耳聋患者的病因诊断提供有价值的临床参考，也能筛查新生儿、孕期夫妇是否为携带者，为耳聋的产前诊断、新生儿先天耳聋病因诊断提供帮助。本试剂盒具有闭管高通量自动化操作及分析的特点，尤其适合临床实验室使用。

主权项

一种采用实时荧光聚合酶链反应技术(FQ‑PCR)检测GJB2基因233‑235位点C缺失(235delC)突变的方法，其特征在于以GJB2基因第235位点碱基缺失处设计特异性野生型探针及突变型探针，野生型及突变型探针分别被标记上不同颜色的荧光，同时在GJB2基因第235位点碱基两侧设计特异性扩增引物，对于检测样本，依据野生型与突变型探针在PCR扩增中产生的荧光颜色不同来判断样本是否存在突变。