一种四倍体金线莲的培育方法

摘要

一种四倍体金线莲的培育方法，本发明包括金线莲（Anoectochilusroxburghii）人工授粉、非共生萌发、诱变剂处理、壮苗培养和试管苗移栽等各阶段。金线莲开花后采取人工方法授粉，将成熟的金线莲蒴果经消毒后切开把种胚接种到萌发培养基上培养形成原球茎，然后转入含有诱变剂的液体分化培养基进行诱变处理，再接种到壮苗培养基进行壮苗培养，最后进行试管苗移栽。本发明简单易行，诱变频率达到75%以上，同时也可大幅度提高金线莲的药材产量，为金线莲多倍体育种、遗传改良和新品种培育开辟了一条新途径。

主权项

一种四倍体金线莲的培育方法，其特征在于包括以下步骤：（1）人工授粉：按常规方法进行栽培管理，选定株系优良的金线莲植株作为亲本，在金线莲开花后进行异花授粉;（2）非共生萌发：在金线莲蒴果发育基本成熟而果实未开裂时，经75%～80%的酒精溶液消毒2～5分钟后，用无菌水冲洗2～5次后置于0.1%升汞溶液消毒8～15分钟，经无菌水冲洗2～5次后用无菌滤纸吸干，然后用无菌解剖刀沿蒴果纵轴方向将蒴果切开，用接种针将黄色种胚接种到萌发培养基上培养，培养20～30天后种子萌发成原球茎;（3）诱变剂处理：将非共生萌发开成的原球茎转入含有诱变剂的液体分化培养基中，在25～28℃条件下进行间歇振荡诱变处理240～480小时;（4）壮苗培养：将经诱变处理的金线莲原球茎接种到壮苗培养基上培养，进一步形成5～8cm高的带根小苗;（5）试管苗移栽：将培养瓶瓶盖打开并置于自然光照下炼苗5～7天后，将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，栽入由泥炭土和松树皮（1：3）混合成的基质中并按常规的二倍体金线莲进行大田栽培管理;上述（2）～（4）各步骤中的培养条件均为：培养温度25～30℃，每天光照10～15小时，光照强度1500～2000lx。