一种荧光PCR检测单纯疱疹病毒I型的试剂盒

摘要

本发明涉及一种荧光PCR检测单纯疱疹病毒I型的试剂盒，特别是涉及以实时荧光聚合酶链反应技术快速、定性检测单纯疱疹病毒I型感染的试剂盒。本试剂盒具有很高的灵敏度和特异性，通过本发明的试剂盒实现对样本中单纯疱疹病毒I型核酸DNA进行定性检测，适用于单纯疱疹病毒I型感染的辅助诊断，抗病毒治疗的疗效监测和流行病学研究。

主权项

一种荧光PCR检测单纯疱疹病毒I型的试剂盒，试剂盒包括：(1)核酸提取试剂、HSV‑1反应液A、HSV‑1反应液B、HSV‑1内标溶液、阴性质控品、HSV‑1强阳性质控品、HSV‑1临界阳性质控品，和(2)分隔并集中包装这些试剂的瓶或管的包装盒，其中PCR反应体系包括HSV‑1反应液A和HSV‑1反应液B，其特征在于HSV‑1反应液A中用于靶多核苷酸扩增的正向和反向引物分别是：5’‑TTATCCCATTCCTTTTGGTTCTT‑3’(SEQ ID NO：1)5’‑GGGTCATGTTGGGGGCTT‑3’(SEQ ID NO：2)用于靶多核苷酸扩增的寡核苷酸探针是5’‑X‑TGGGGTTGGGTGGTGGAGGAGA‑Y‑3’(SEQ ID NO：3)，其中的X表示荧光发射基团FAM，Y为BHQ1；用于内标多核苷酸扩增的寡核苷酸探针是5’‑X‑CCTGCTCTGACTCTGACCATCCCTG‑Y‑3’(SEQ ID NO：4)，其中的X表示荧光发射基团HEX，Y表示BHQ1；所述的HSV‑1反应液B由热启动Taq酶、dNTPs、酶稀释液组成；所述的HSV‑1内标溶液，含有内标靶区域选取与HSV‑1目标区域一致，并在探针位置人工合成一段多核苷酸的内标质粒；所述的阴性质控品为生理盐水，HSV‑1强阳性质控品和HSV‑1临界阳性质控品均含有HSV‑1病毒株。