TAT-凋亡素基因修饰T细胞的方法

摘要

本发明涉及一种TAT-凋亡素基因修饰T细胞的方法，将TAT-凋亡素基因从pUC57-TAT-apoptin中亚克隆至Ad5/F35MaxTM系统的穿梭载体pDC316中，构建穿梭质粒pDC316-TAT-凋亡素；将步骤a所得pDC316-TAT-凋亡素与pBHG-fiber5/35骨架质粒运用脂质体法共转染293细胞，通过Cre/loxP系统作用发生定点重组获得含有TAT-凋亡素Ad5/F35-TAT-凋亡素重组腺病毒；将所述Ad5/F35-TAT-凋亡素重组腺病毒通过倍比扩增，富集病毒感染T细胞，获得含有TAT-凋亡素基因修饰的T细胞。该TAT-凋亡素基因修饰的T细胞能够有效增强对肿瘤细胞的杀伤性。在细胞内能够高效的分泌表达并进行有效地内源性递呈，从而在肿瘤存在的部位不断累积，其分泌的凋亡蛋白可以成功作用于病变细胞并诱导凋亡。

主权项

一种TAT‑凋亡素基因修饰T细胞的方法，其特征在于由如下步骤组成：a.将TAT‑凋亡素基因从pUC57‑TAT‑apoptin中亚克隆至Ad5/F35MaxTM系统的穿梭载体pDC316中，构建穿梭质粒pDC316‑TAT‑凋亡素；b.将所述pDC316‑TAT‑凋亡素与pBHG‑fiber5/35骨架质粒运用脂质体法共转染293细胞，通过Cre/loxP系统作用发生定点重组获得含有TAT‑凋亡素Ad5/F35‑TAT‑凋亡素重组腺病毒；c.将所述Ad5/F35‑TAT‑凋亡素重组腺病毒通过倍比扩增，富集病毒感染T细胞，获得含有TAT‑凋亡素基因修饰的T细胞。