一种将穿梭质粒导入黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）的转化方法

摘要

本发明公开一种能在大肠杆菌和黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）中穿梭表达的重组质粒转化进入谷氨酸棒杆菌和营养缺陷型黄色短杆菌的快速有效方法。本发明提供的方法包括制备感受态细胞和高温培养转化两个步骤：（1）将营养缺陷型黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）接种至特殊配制的培养基上，使营养缺陷型黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）快速增殖，之后再转接到营养缺乏的培养基上，制备感受态细胞。（2）将待转化的质粒和上述制备的感受态细胞混匀并冰浴，然后恒温培养，将质粒导入到所述待转化的黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）中。本发明提供的方法，能减少黄色短杆菌对穿梭质粒的限制性酶切作用，并能稳定复制和传递，转化效果好，操作简便。

主权项

在特殊的培养基上使得细菌细胞处于感受态的状况下，能将在大肠杆菌和黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）中穿梭表达的质粒转化进入到营养缺陷型黄色短杆菌（或谷氨酸棒杆菌）中的方法，包括制备感受态细胞和转化两个步骤。