主权项 |
一种提高利迪链菌素产量的方法,其特征是包括如下步骤:(1)培养基和氨基酸母液的配制:①种子培养基:淀粉10~100g,葡萄糖1~10g,酵母浸粉1~10g,蛋白胨1~10g,MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O0.1~5g,NaCl0.1~5g,K<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>0.1~5g,加水定容至1L,121℃蒸汽灭菌20min;②发酵培养基:淀粉10~100g,葡萄糖1~10g,蛋白胨1~10g,MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O0.1~5g,NaCl0.1~5g,K<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>0.1~10g,加水定容至1L,121℃蒸汽灭菌20min;③脯氨酸母液:称取0.1~5g脯氨酸,用超纯水定容至50~500mL,通过0.1~0.45μm的无菌过滤器,得无菌脯氨酸母液;(2)种子培养:将利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)在种子培养基中培养,得到一级种子;将一级种子在种子培养基中培养,得到二级种子;(3)添加脯氨酸发酵:将100~700ml所述二级种子在3000~6000rpm离心3~20min,得到菌丝体,用100~700ml发酵培养基重悬菌丝体,然后按体积比为5%~30%的接种密度接种到装有发酵培养基的发酵罐中,再加入50~500ml脯氨酸母液,在搅拌转速为200~600rpm,通气量为1~3vvm,pH为6~8的条件下,发酵80~150h,得发酵液;(4)利迪链菌素含量测定:取发酵液在4~30℃,转速为8000~15000rpm,离心5~20min,收集上清液,过0.1~0.45μm滤器,得滤液;测定利迪链菌素含量。 |