发明名称 |
恶性疟原虫纳米磁分离实时荧光定量PCR检测试剂盒及核苷酸序列 |
摘要 |
本发明涉及一种恶性疟原虫纳米磁分离实时荧光定量PCR检测试剂盒及核苷酸序列,设计了恶性疟原虫特异的引物和探针,优化了实时荧光PCR检测体系;针对恶性疟原虫的一对引物,结合普通PCR技术和分子克隆技术,构建了恶性疟原虫质粒标准品,建立了目的基因拷贝数与荧光检测信号之间关系的标准曲线,实现了恶性疟原虫的实时荧光定量检测。本试剂盒将纳米磁微粒分离疟原虫核酸技术与实时荧光定量PCR技术有机结合,在标本核酸提取方面具有操作方便、价廉、快捷、高效的特点,尤其在滤纸干血片核酸提取和提取微量全血核酸方面具有很大优势,实现了扩大检测范围、最大程度降低漏检率的目标,本试剂盒的检测限为25copies/μL。 |
申请公布号 |
CN103937907A |
申请公布日期 |
2014.07.23 |
申请号 |
CN201410201466.8 |
申请日期 |
2014.05.14 |
申请人 |
中华人民共和国北京出入境检验检疫局 |
发明人 |
刘翌;王飞;田茵;孙宁;杨静;孙福军;刘艳华;薛强;高璟瑜;张绍福;邹明强;邓丛良;葛广路 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
天津盛理知识产权代理有限公司 12209 |
代理人 |
王来佳 |
主权项 |
一种恶性疟原虫纳米磁分离实时荧光定量PCR检测试剂盒,其特征在于:所述试剂盒包括如下组分:纳米磁微粒、标本稀释液、裂解液、结合液、洗液、洗脱液、实时荧光PCR反应液、质粒标准品、阳性对照、阴性对照;所述的纳米磁微粒为用无水乙醇配制的纳米磁微粒溶液;所述标本稀释液为磷酸盐缓冲液PBS;所述裂解液为5M异硫氰酸胍溶液;所述结合液为无水乙醇;所述洗液为70%乙醇;所述洗脱液为TEpH8.0;所述实时荧光PCR反应液包括上游引物F1,见序列1,下游引物R1,见序列2和荧光探针P1,见序列3;所述的质粒标准品为含有恶性疟原虫基因片段(S)的质粒;所述的阳性对照为恶性疟原虫质粒标准品;所述的阴性对照为正常人全血核酸提取液。 |
地址 |
100026 北京市朝阳区甜水园街6号 |